在微生物發酵中，也存在混菌發酵，但也是已知混菌，只要是研究就只允許生產菌種存在，不能因為混雜其他菌種而影響試驗結果或無法分析試驗結果。因此，對所需物品和材料滅菌，環境消殺非常重要。

下面一起學習一下既方便又實用的實驗室滅菌消毒方法。

二、微生物實驗室常用的滅菌方法

（一）干熱滅菌法

定義：顧名思義，在干燥高溫環境（如火焰或干熱空氣）條件進行滅菌的技術，不需要加水等操作。

原理：干熱滅菌是在高溫條件下將微生物細胞內的蛋白質凝固變性而達到滅菌的目的。

分類：主要包括火焰滅菌法和干熱空氣滅菌法。

1.火焰滅菌法

滅菌方法：又叫灼燒法，直接用酒精燈火焰等灼燒器械或器皿的方法。

適用范圍：實驗室接種針、鑷子等金屬器械滅菌，三角瓶、培養皿和試管等瓶口的滅菌。

注意事項：使用過程中，注意冷卻時間，以免影響目標菌種。

2. 干熱空氣滅菌法

滅菌條件：干熱空氣滅菌所需溫度更高（160-170℃），時間更長（1-2h），一般160℃、滅菌2h，但干熱滅菌溫度不能超過180℃，否則包器皿的紙或棉塞就會燒焦，甚至引起燃燒。

適用范圍：耐高溫的玻璃和金屬制品，不允許濕熱氣體穿透的油脂和耐高溫的粉末化學藥品。

優點：無毒、不傷害環境、對金屬和鋒利的儀器無腐蝕性。

缺點：熱穿透速度慢、殺菌殺滅耗時、不適用于大多數材料。

注意事項：

使用過程中，物品不能擺放太擠，需要留出一定的空間，以免影響空氣流通；

物品不能靠壁，以免燒焦或起火。

（二）濕熱滅菌法

定義：跟干熱滅菌相對，它是一種利用高溫和濕潤條件滅菌的方法，主要使用高壓蒸汽、沸水或流通蒸汽進行滅菌。主要指高壓蒸汽滅菌法，高壓蒸汽滅菌是最常用滅菌最徹底的滅菌方法。

滅菌條件：實驗室常用的滅菌方法。將待滅菌物品放入高壓蒸汽滅菌鍋中，通過加壓高溫蒸汽進行滅菌，通常在121℃下保持20-30分鐘。根據不同的物品，選擇不同的滅菌溫度和滅菌時間。

優點：蒸汽來源容易，操作費用低廉，無毒，滅菌徹底，不會留下任何化學殘留物，對環境無污染。

缺點：設備費用高，不能用于怕受潮的物料滅菌。

注意事項：

原理：將液體或氣體通過有微孔的濾膜過濾，使大于濾膜孔徑的細菌等微生物顆粒阻留，從而達到除菌的方法。

濾膜孔徑應在0.22～0.45μm范圍內或用更小的細菌濾膜，溶液通過濾膜后，細菌和孢子等因大于濾膜孔徑而被阻，并利用濾膜的吸附作用，阻止小于濾膜孔徑的細菌透過。

適用范圍：多用于遇熱易發生分解、變性而失效的試劑、酶液、血清、培養液等。

2. 巴氏消毒法

適用范圍：乳制品多采用巴氏消毒法，將需要滅菌的液體加熱至68℃左右，保持15-30min，以殺死其中的病原菌。

優點：減少營養成分流失，保留食品風味。

缺點：不能殺死所有細菌，滅菌不徹底。

3. 甲醛熏蒸法

原理：甲醛是一種無色易溶于水的有機化合物，具有刺激性氣味。它是一種傳統的滅菌劑，通過與微生物的蛋白質、核酸等生物分子發生反應，破壞其結構和功能，從而殺死微生物。

適用范圍：實驗室環境消殺。

優點：不受環境溫度、濕度和微生物種類等影響，因此被廣泛應用于各種場所的消毒。

缺點：甲醛對眼睛、皮膚和呼吸系統等具有刺激作用。

注意事項：

甲醛蒸汽在遇到明火或高溫時會發生爆炸，需要避免火源。

利用紫外線燈進行照射滅菌的方法。紫外線是一種低能量的電磁輻射，可以殺滅多種微生物。

滅菌方法：使用前打開紫外燈照射，時間為30min。使用時關閉紫外燈，通風5-10min，再進行操作。

原理：通過對微生物的核酸及蛋白質等的破壞作用而使其滅活。

適應范圍：適合于實驗室空氣、地面、操作臺面滅菌。

優點：

紫外線消毒不會產生任何化學物質，因此不會帶來環境污染；

紫外線消毒速度相對快；

紫外線消毒的效果非常好，可以殺滅包括細菌、病毒、真菌等多種病原體；

紫外線消毒設備相對簡單，安裝和維護成本較低。

缺點：

紫外線對光線的穿透力較弱，因此只能對表面的病原體進行消毒，對于深層的病原體效果較差；

紫外線消毒存在死角，容易有消毒盲區；

紫外線消毒的效果受到多種因素的影響，例如溫度、濕度、水質等，需要嚴格控制消毒環境。

注意事項：

操作過程中，要關閉紫外燈；

紫外線燈管壽命較短，紫外線消毒設備需要定期維護，以確保消毒效果。

5.臭氧法

原理：臭氧是一種強氧化劑，能夠氧化分解細菌內部酶類，破壞他們的細胞器和DNA、RNA，作用于外膜的脂蛋白的內部的脂多糖，使細菌發生通透性畸變而溶解死亡。