疑惑：

實驗中，需要用移液槍來移液，槍頭滅菌了但槍不能滅菌，怎么實現無菌操作？要移的液體量只有幾十微升用移液管不好實現，主要是擔心槍里面的無菌情況，在吸打時那些空氣是直接接觸液體的呀。

支招：

1.有可以滅菌的移液槍，如果沒有 還是用吸管好 別圖省事~或者可以用紫外線進行照射，表面滅菌還可以。

2.槍頭滅菌，移液槍70％酒精擦拭。移液時注意慢吸快打，移液量不超過槍頭2/3即可。

3.你可以在槍頭上部塞上脫脂棉再去滅菌，然后再使用。

4.我看用移液槍的問題關鍵在于你要求的無菌級別高低以及操作的規范和熟練程度。我現在做活菌計數就用移液槍做梯度稀釋，沒有問題，很少有雜菌污染。

體會：

1.移液槍頭可以浸泡在75%酒精中過夜，甚至更長時間。

2.移液時槍盡量不要碰到器皿壁。

3.最好在超凈工作臺上操作，超凈工作臺內的空氣可以認為是無菌的，這樣吸進槍管中的空氣很少，可以認為樣品不會被污染。

4.操作熟練程度關系實驗成敗，建議你先用普通肉湯培養基，和其他非實驗菌進行操作練習，熟練后再進行你的正式試驗。 

5.關鍵是滅菌的tip頭是要有脫脂棉的tip頭，然后對移液槍進行表面消毒就行了。 

6.其實不用那么麻煩，你可以將一般的移液槍放在超凈臺中，打開紫外燈滅菌半小時，使用時先將移液槍用（70％－75％）酒精棉擦拭表面，然后在酒精燈火焰上2cm左右處將移液槍反復吹打幾次即可。有網友是這么操作的，也沒有出現染菌的問題！ 

7.移液槍放置在超凈臺中和臺子一起紫外滅菌半小時；槍身用75%酒精擦拭；槍頭塞入脫脂棉一起滅菌；這樣使用應該沒問題，以網友實踐經驗來說。 

8.槍頭是經過高壓消毒的,直接接觸液體的是槍頭又不是別的,網友覺得剩下的無非就是無菌操作的問題了,紫外線消毒移液槍就足夠了,還泡啥泡,多余. 

小結

關于如何保證移液器的無菌使用，不少朋友提出用紫外線照射，實際上并不恰當。以Gilson移液器為例。

首先，移液器的桿柄（通常為白色部分）是有機高分子化合物，說白了就是類似塑料的東西。日常生活中大家知道，露天暴曬的塑料容易變脆。經常用大劑量、長時間的紫外線照射移液器同樣會極度加速其老化。我們實驗室曾經有一把槍從前面的金屬圈處（圖中a處）斷掉，維修人員給出的解釋之一就是經常照射使其脆性增加。

其次，將移液器放在超凈臺中照射時，其靠近臺面的一側以及被金屬架遮蓋的部分并不能被照到，所以消毒是不徹底的。
有朋友提出將移液器在酒精燈2cm處反復吸吹幾次以消毒內部空氣的方法。這樣操作時移液器的的末端同樣可能因溫度高而加速老化，天長日久甚至可能導致局部變形，而一旦末端不是絕對的圓潤，且老化后喪失應有的彈性，其與槍頭之間的密封性將不能得到保證。

另外對于實驗室多人公用的移液器，有時會有人不注意就將培養液等吸入移液器桿柄而又未能及時清理，最后會在桿柄內部形成衛生死角，甚至成為污染源。

根據經驗，針對Gilson移液器（或類似結構者）推薦下列使用、保養方法：

1.日常消毒，用70%酒精棉球擦拭移液器桿柄表面。使移液器末端（a端）稍低于手持端（c端）并使金屬推桿在下方（如上圖），使用吸滿酒精的棉球，還能夠保證移液器的金屬退桿內面被酒精覆蓋、消毒。按動金屬退桿同時擦拭被退桿末端（a處）環柄包住的部分。對重要實驗若需更加仔細消毒，可將金屬退桿拔下，徹底擦拭消毒。

2.不定期將金屬退桿拔下，將白色塑料桿柄從b處擰下，用酒精棉球清理桿柄內部。此時可能需要使用鈍頭鐵絲等挾持小棉球以便夠著末端較細的部位。 

相信盆友們一定有很多關于移液槍的故事，識別二維碼關注“食品微生物檢測”公眾號，在后臺給小編留言，分享你在實驗中的移液故事。