答：每個制備批次的培養基都應測定pH，可采用pH試紙或pH計測量。

2.含瓊脂培養基冷卻至25℃后已凝固，如何測定其pH？

答：有專門的固體培養基pH計，如Radiometer A/S, DK22400 Copen2 hagen NV, Denmark 或者Microelectrodes Inc1, NH 03053,U1S1A1 。

3. 稀釋液滅菌后pH值是否有變化？有何影響？（如pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液，pH6.8無菌磷酸鹽緩沖液） 

答：一般pH有下降現象，約0.2左右，不同培養基pH變化可能不同。 

4. 孟加拉培養基是否可以取代玫瑰紅鈉瓊脂進行培養霉菌和酵母菌？ 

答：根據中國藥典，采用玫瑰紅鈉瓊脂。

5. 配制pH值7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液時有時因為高壓滅菌器滅菌過程溫度過高而導致培養基混濁了，這種情況緩沖液還能用嗎？ 

答：建議按正常溫度滅菌，混濁培養基建議不要使用。

6.含瓊脂培養基在冷藏中形成冰晶怎么處理？銷毀還是加熱再用？

答：建議不要使用。

7.融化的培養基為什么不能再冷水中冷卻？ 

答：防止受熱不均引起結塊。 

8. 滅菌后，滅菌鍋需自然冷卻降壓才可以打開，這段時間是否會造成過度滅菌。

答：自然冷卻過程已經計算在正常滅菌時間內了，不會造成過度滅菌。 

9. 培養基所用器具若使用濕熱滅菌，是否必須待干燥后才可以使用？若烘干或其它方法，中間過程怎樣防止微生物污染？ 

答：如果是馬上使用且不是用于非水溶性供試液的制備及實驗，不一定要烘干；否則，應干燥后使用，滅菌及干燥盡量在同一鍋里進行，或用紗布和牛皮紙包扎緊密。

10. 培養基的避光儲存，是否配置好的培養基其全部放避光儲存？ 

答：最好都避光保存。無條件時，光敏感的培養基一定要。 

11. 商品培養基干粉說是加蒸餾水溶解，實際操作是否可以用純化水或注射用水？

答：只要不含有任何可能抑制或影響微生物生長的物質的水均可。

12. 培養基及器具滅菌可否同一設備同滅菌時間進行滅菌？

答：最好分開滅菌，條件不允許時可同爐滅菌，前提是都是潔凈無污染的。

13. 培養基的保溫能否用60℃的培養箱，它與45℃-55℃水浴鍋保溫方法有何不同？ 

答：可以用恒溫培養箱保溫，但保溫溫度一般是50℃左右，且時間不能過長，一般是不超過4小時。

14. 培養基的貯存是否需要放置于2-10℃冰箱內？ 

答：需冷藏保存的培養基外包裝上會寫明。

15. 培養基滅菌后成份會有所蒸發減少，如何處理這個問題？

答：正常情況下蒸發量較少，可忽略不計。

16. 培養基融化后出現渾濁是有哪些方面的原因引起的？應如何避免？ 

答：可能的情況有:

1. 培養基配置用水不符合規定；

2. 滅菌過程溫度升溫慢或降溫慢；

3. 培養基儲存不當；

4.融化時沸騰時間較長等。

17. 準備好的培養基有效期如何驗證？ 

答：定期取出培養基驗證其無菌性，促生長能力等方面。

18. 培養基配制好滅菌后，在高壓容器中保溫降至50℃左右，可不可行？ 

答：建議最好不要，避免過度受熱。 

19. 脫水培養基對濕度是否有要求？多少適宜？ 

答：按要求室溫干燥環境儲存即可。 

20. 培養基pH值測定溫度在25℃，這個溫度應怎么控制？比如固體培養基，固體培養基使用過程中還能調節pH值嗎？ 

答：可水浴控制培養基溫度。

21. 配制培養基過程中，按說明書稱定量，加規定的純化水，煮沸溶解，為了避免煮沸過程總減少水分，是否要在配制過程適當增加水?比如陪硫乙醇酸鹽流體培養基. 

答：可適量增加，自己掌握。

22. 商品培養基一定要當天配當天用嗎？可否在一周內用完？ 

答：不是即配即用的培養基的話，儲存的當，可以使用。

23. 稱量培養基時，注意不要吸入粉末，這粉末是指何物？ 

答：就是你所稱量的干粉培養基 ，因為培養基的粉末對呼吸道有刺激作用，而且培養基中的某些成分，如亞硒酸鹽、疊氮化鈉、乙酰胺等，長期吸入并在體內累積到一定量會對人體健康有危害。所以培養基配制稱量需做好個人防護，且最好選擇少粉塵環保型顆粒培養基。

24. 煮培養基，用不銹鋼鍋在電磁爐上煮可行？硫乙醇培養基是否要煮沸？如何煮沸？用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸可行嗎？可不可以水浴煮沸呢？ 

答：硫乙醇應煮沸，量大時，我實驗室用不銹鋼鍋在電磁爐上煮沸。不建議水浴煮沸，因為水浴煮沸瓊脂粉很難溶，導致瓊脂分裝不均勻，前段分裝的瓊脂含量少，后段分裝的瓊脂含量高，導致有的管或瓶中的FT凝固。

25. 如培養基在高壓滅菌器中溫度需自然下降20度才開蓋嗎？ 

答：高溫滅菌器有安全閥，溫度下降到安全閥可打開時將培養基取出室溫冷卻，各型號滅菌器安全開蓋溫度不盡相同。

26.平板涂布和平板劃線培養基表面水分過多，菌落蔓延如何解決？

答：對于采用表面接種形式培養的固體培養基，應先對瓊脂表面進行干燥：揭開平皿蓋，將平板倒扣于烘箱或培養箱中（溫度設為25℃～50℃）；或放在有對流的無菌凈化臺中，直到培養基表面的水滴消失為止。注意不要過度干燥。商品化的平板瓊脂培養基應按照廠商提供的說明使用。