一、拿樣/取樣

拿樣：已有人取好樣品，放在一個(gè)固定的地方，檢測(cè)員每天上班后，拿好一個(gè)干凈的密閉容器，去把樣品拿回實(shí)驗(yàn)室，期間注意樣品被污染。

取樣：也叫抽樣，需要自己去取/抽，去成品庫(kù)取成品，去車間現(xiàn)場(chǎng)取半成品、接觸面、非接觸面、水、冰、內(nèi)包袋、空氣、輔料等。無(wú)菌取樣，熟悉取樣方法、流程，帶好取樣工器具，做好樣品標(biāo)識(shí)。取完樣，放在干凈密閉的容器，帶回實(shí)驗(yàn)室，做好樣品登記。

二、無(wú)菌室滅菌

一般采用紫外燈滅菌。實(shí)驗(yàn)室前、后打開(kāi)紫外燈照射30分鐘。注意實(shí)驗(yàn)前關(guān)燈后30min方可進(jìn)入室內(nèi)工作。很多人分不清無(wú)菌室和超凈工作臺(tái)的使用和區(qū)別，本人理解：無(wú)菌室是用來(lái)做樣品前增菌的，超凈工作臺(tái)是用來(lái)做致病菌分離和特征/可疑菌落的進(jìn)一步驗(yàn)證的。

三、配制培養(yǎng)基和相關(guān)試劑

現(xiàn)在用的干粉培養(yǎng)基較多，按照檢測(cè)方法需要的培養(yǎng)基，買回來(lái)就行；用過(guò)的廠家有：北京陸橋、青島海博和廣州環(huán)凱。按照樣品數(shù)量配制相應(yīng)的培養(yǎng)基，也可以多配點(diǎn)，放著冷藏保存，有效期7天。干粉培養(yǎng)基保質(zhì)期一般是3年，開(kāi)封后1年，一年一瓶都用不了的，稀少。配制培養(yǎng)基的水，一般選擇單蒸水。

培養(yǎng)基一般選擇濕熱滅菌法，稱量好干粉培養(yǎng)基，加入相應(yīng)的單蒸水，攪拌溶解后分裝，塞上瓶塞或試管塞，用報(bào)紙或牛皮紙包扎好，橡皮筋捆好，放入高壓滅菌鍋。現(xiàn)在有些實(shí)驗(yàn)室是手提式滅菌鍋，需要手動(dòng)排氣，人工計(jì)時(shí)，看壓力表，比較累。   

培養(yǎng)皿和吸管：一般選擇干熱滅菌，可我工作過(guò)的幾個(gè)實(shí)驗(yàn)室，干燥箱基本是用來(lái)干燥的（使用溫度高容易壞，滅菌時(shí)間太久不想等待），也可以不用外校。培養(yǎng)皿和吸管包扎好后，放入高壓滅菌鍋滅菌。

培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、吸管等，滅好菌后，需冷卻；然后通過(guò)傳遞窗搬進(jìn)無(wú)菌室。

四、無(wú)菌室增菌

采樣注意部位和代表性，一般采取可食部位。致病菌采樣部位視具體樣品而定。注意交叉污染。現(xiàn)在一般采用拍打式均質(zhì)器。

五、做好標(biāo)識(shí)

每個(gè)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)識(shí)最好是統(tǒng)一的做法，這樣大家都能認(rèn)識(shí)，把增菌好的試管和瓶子，通過(guò)傳遞窗拿到培養(yǎng)室放進(jìn)相應(yīng)的培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

六、整理無(wú)菌室

做完實(shí)驗(yàn)，需要把無(wú)菌室整理好，工器具擺好位置，臺(tái)面做好清潔衛(wèi)生。打開(kāi)紫外燈滅菌30分鐘。

七、影響微生物檢測(cè)結(jié)果的因素

7.1 人 上崗培訓(xùn)，熟悉檢測(cè)方法；

7.2 機(jī) 儀器設(shè)備正常運(yùn)行，定時(shí)維護(hù)保養(yǎng)；

7.3 料 材料正確，有效；

7.4 法 檢測(cè)方法適合樣品檢測(cè)要求；

7.5 環(huán) 環(huán)境滿足微生物檢測(cè)要求。

八、微生物檢測(cè)的幾點(diǎn)看法

8.1 資質(zhì)證書：今年取消的食品檢驗(yàn)工資格考試，而且每個(gè)省份，每個(gè)行業(yè)要求不一樣，最好是邊工作邊考證。進(jìn)入工作崗位，工作能力比證書重要。

8.2  熟悉檢驗(yàn)方法，下載現(xiàn)行有效的版本，食品伙伴網(wǎng)提供免費(fèi)下載。

8.3  25g稱樣量的波動(dòng)范圍，GB4789標(biāo)準(zhǔn)中沒(méi)有明確，美國(guó)《微生物實(shí)驗(yàn)室指南》中提到：a.溫度的波動(dòng)范圍是±1℃；b.重量和容量的波動(dòng)范圍是±1%；在該指南的第4.09章沙門氏菌檢驗(yàn)中又指出：除特別規(guī)定，方法中所有指標(biāo)的波動(dòng)范圍是±2%。據(jù)此推理，25g稱樣量的波動(dòng)范圍在±0.5g以內(nèi)是合適的。

8.4  儀器計(jì)量  溫度、重量，壓力等影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的儀器需要外校，同時(shí)實(shí)驗(yàn)室需要內(nèi)校，溫度用水銀溫度計(jì)內(nèi)校，重量用標(biāo)準(zhǔn)砝碼內(nèi)校。一般外校的有效期是1年，高壓滅菌鍋的壓力表是半年。

8.5 參加培訓(xùn)，多學(xué)習(xí)肯定是好的。

8.6 有條件的，每年至少參加一次外部能力驗(yàn)證，檢驗(yàn)一下實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度，同時(shí)提升實(shí)驗(yàn)室的可信度，外部審核或客戶驗(yàn)廠，都會(huì)問(wèn)能力驗(yàn)證這塊。如果有并且獲得滿意結(jié)果，回答時(shí)的底氣都足些。

好了，今天的分享就到這里，歡迎小伙伴們踴躍投稿，分享自己在檢測(cè)過(guò)程中的經(jīng)驗(yàn)。