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糞鏈球菌及檢驗

放大字體  縮小字體 發布日期:2010-09-01
核心提示: 一、生物學性狀  根據最新分類原則,糞鏈球菌又叫糞腸球菌。應用C多糖抗原,根據蘭氏(Lancefield)血清學分類,

一、生物學性狀

  根據最新分類原則,糞鏈球菌又叫糞腸球菌。應用C多糖抗原,根據蘭氏(Lancefield)血清學分類,可將鏈球菌分成許多群。糞鏈球菌屬于D群。D群鏈球菌分腸球菌和非腸球菌兩類。前者包括糞鏈球菌(S.faecalis)、屎鏈球菌(S.faecium)和堅忍鏈球菌(S.durans),后者有牛鏈球菌(S.bovis)和馬腸鏈球菌(S.equinus)。

  糞鏈球菌菌形圓或橢圓,可順鏈的方向延長,直徑0.5-1.0微米,大多數成雙或短鏈狀排列,通常不運動。在豐富培養基上菌落大而光滑,直徑1-2mm,全緣,罕見色素。其營養要求低,在普通營養瓊脂上也可生長。能在10℃或45℃ pH 9.6或含6.5%NaCl肉湯培養基中生長,并能耐65℃ 30分鐘。它可利用精氨酸為能源,發酵山梨醇,不發酵阿拉伯糖。在簡單的培養基上生長不需葉酸。

   近年來,DNA-DNA雜交結果顯示,腸球菌與鏈球菌屬同源程度低,故有學者建議另立腸球菌屬,與人類有關者為糞腸球菌(E.faecalis)和屎腸球菌(E.faecium)。

二、致病性

   糞鏈球菌引起的感染有尿路感染、化膿性腹部感染、敗血癥、心內膜炎和腹瀉發燒等。其中敗血癥最常繼發于生殖泌尿性感染,皮膚、膽道、腸道等感染也可作為原發病灶。從天然乳清培養物中分離的菌株,能產生一種細菌素,叫腸球菌素(Enterocin),對單增李斯特氏菌有殺滅作用。

三、流行病學

  糞鏈球菌為條件致病菌,它來源于人和溫血動物的糞便,偶爾出現于感染的尿道及急性心內膜炎。它能夠通過食品對人類造成感染,因而常見于許多食品,如火腿腸、炸肉丸、布丁及經過巴氏消毒的牛奶等,糞鏈球菌進入食物鏈的主要原因是不衛生的加工條件所致的,一般與直接的糞便感染無關。糞鏈球菌引起的感染大多是由于它的侵襲所造成,感染劑量較高,一般大于107個細菌。人、禽感染率最高,亦見于豬、牛、馬、山羊、綿羊及兔。

四、檢驗與控制

1、檢驗:

  樣品制備 取25g或25mL樣品,放入225mL滅菌生理鹽水中,充分混勻,制成1:10樣品稀釋液。根據樣品的污染程度,制成適當的10倍遞增稀釋液。

  a.多管法:

  用適當的稀釋液接種一套疊氮化鈉葡萄糖肉湯管。接種量為1mL或以下的,使用10mL單料管;接種量為10mL,使用10mL雙料管。35℃培養24-48h,并檢查記錄各管的混濁情況。用接種環將渾濁管中的培養物劃線于PSE平板上,倒置平板于36℃培養24h。平板上出現的帶棕色環的黑色菌落,確證為糞鏈球菌。根據接種的樣品量和確證為是糞鏈球菌的管數,查MPN表,報告每克樣品中的糞鏈球菌MPN值。

  b.濾膜法:

  傾注融化的4-5mL的KF瓊脂于平板上,若平板表面有氣泡,可用火焰灼除。根據樣品的污染程度,使用樣液的量為100,10,1.0,0.1或0.01mL。使用滅菌濾膜過濾樣液,以能在濾膜上生長出20-100個菌落為宜。將濾過樣液的濾膜緊貼在KF瓊脂培養基表面上,避免出現氣泡。倒置平板于36℃培養48h。糞鏈球菌在KF平板濾膜上形成暗紅色至粉紅色菌落。將典型菌落接種于腦心浸液斜面上,36℃培養48h。用其培養物做過氧化氫試驗,過氧化氫濃度為3%,陽性反應者為非糞鏈球菌群細菌。將陰性反應者接種于腦心浸液肉湯,置45.5℃培養48h;同樣方式接種一管膽鹽肉湯,置36℃培養3天。在上述兩種情況下生長者為糞鏈球菌。選擇生長20-100個菌落的濾膜,根據所使用的樣品量,計算出樣品每克(毫升)中的糞鏈球菌數。

  c.平板計數法:

   取1mL適當稀釋液加入培養皿內,傾入12-15mL的KF或PSE培養基,轉動平板充分混合。凝固后置36℃培養,KF平板培養48h,PSE平板培養24h。糞鏈球菌在KF平板上形成暗紅色至粉紅色菌落,邊緣整齊,瓊脂表面下菌落呈橢圓或晶體狀;在PSE平板上形成帶棕色環的棕黑色菌落。選擇有30-300個菌落的平板進行記數。按糞鏈球菌數/g(mL)報告結果。

2、控制

  由于糞鏈球菌可通過食物對人類造成感染,所以應從以下幾個方面加以控制:

  加強生產區域的衛生管理,由于糞鏈球菌主要來源于人畜糞便,所以廁所要合理布局,避免糞便直接污染;生產人員要嚴格執行個人衛生制度。

  在加工過程中,嚴格注意每個關鍵點的控制,掌握好諸如溫度、水源衛生等要素。

  對擺放時間過長的食物,如熟食制品、牛奶或奶制品等,要徹底加熱再食用,春夏季尤其要注意。

編輯:foodadmin

 
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關鍵詞: 糞鏈球菌
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