在各種微生物檢驗中,我們會看到標準中會涉及CFU/g或CFU/mL這些單位。什么是CFU?CFU代表了什么?我們先從CFU的基本定義開始。
CFU:Colony-Forming Units(菌落形成單位)指單位體積中的細菌、霉菌、酵母等微生物的群落總數。
在活菌培養(yǎng)計數時,由單個菌體或聚集成團的多個菌體在固體培養(yǎng)基上生長繁殖所形成的集落,稱為菌落形成單位,以其表達活菌的數量。
我們都非常清楚了解,微生物無處不在,但由于其個體極其微小,往往無法通過肉眼看到,必須借助高倍顯微鏡甚至染色后才能清楚觀察到。而菌落形成單位(CFU)則是通過分散、稀釋,最終由單個菌體或聚集成團的多個菌體在固體培養(yǎng)基上生長繁殖所形成的肉眼可見的菌落數來反推樣品中活菌數量的一種方式。
這種方式得出的數據,并不是直接反映樣品中的微生物數量,而是一種認可的估算,所以要求操作者平板涂布或者接種之前把微生物活細胞分散均勻。但一些鏈球菌、球菌等天生就不能單細胞分散均勻。另外,考慮到各類樣品的微生物含量不一,為使CFU區(qū)間按照國標計算方法有效落在30-300之間,必須要保證合理的稀釋倍數,過多或者過少都不合適。
2.CFU是一種估算方法
菌落形成單位的計量方式與一般的計數方式不同,一般直接在顯微鏡下計算菌體數量會將活與死的菌體全部算入,但是CFU只計算活的菌體數量,也就是說能夠在平板上生長出來的活的微生物才會形成CFU。理論上,分散均勻的情況下,一個活細胞形成1CFU。在實際操作中為了更好分散,很經常用到渦旋振蕩器進行混勻,但容易出現(xiàn)死菌。
同時,微生物最終能在平板培養(yǎng)基上形成菌落還與培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)溫度及時間、接種方式、潛在微生物類型均有關系。所以,您會發(fā)現(xiàn),高溫高濕天氣時,烘焙食品中更容易出現(xiàn)各類霉菌、細菌污染的質量問題。
最后,來說說CFU的現(xiàn)實意義。舉例來說,若定量菌種的菌種數量標示的是“CFU”,代表是用培養(yǎng)基法來計數的。若定量菌種是用流式細胞儀等其他方式計數,標示“個”更為合理。
通過以上說明,相信大家對CFU和微生物繁殖應該都有了一定的理解。