熒光分子所處的外部化學環境對熒光強度有直接影響.選擇合適的條件不但可以使熒光加強.提高測定的靈敏度.同時.還可以控制干擾物質的熒光產生.改善分析的選擇性。分了熒光分析法具有如下特點:

(l)靈敏度高.山于是在黑背景下測定熒光發射強度一般而言，分子熒光分析法的靈敏度比紫外一可見吸收光洪分析法高2~4個數址級.檢出限可達0.1--0.001ug.cm-3.
    (2)選擇性強。既可根據特征發射光譜，又可根據特征吸收光譜來鑒定物質，還可以采用同步熒光光譜和時間分辨熒光光譜測量方法.進一步提高選擇性。
    (3)試樣量少。分子熒光分析法的主要不足是應用范圍小，這是由于本身能夠發射熒光的物質及能形成熒光測量體系的物質相對較少所致。另外，方法靈敏度高的同時受環境因素的影響也較大。
    2.定量依據與方法
    熒光強度If正比于吸收的光強度I8和熒光最子產率:

 

上式即為定貧的依據。常用的定量方法有標準曲線法和比較法。

當被測物質本身能夠產生熒光時。可通過直接側定熒光強度來確定該物質的濃度。但大多數無機和有機化合物本身并不產生熒光或熒光量子產率很低而不能直接側定，此時，可采用間接側定法測定。間接測定法有兩種方式，一是通過化學反應使非熒光物質轉變成熒光物質，如熒光標記法;二是通過熒光猝滅法測定，即有些化合物具有使熒光體發生熒光猝滅的作用，熒光強度降低值與猝滅劑濃度成線性關系，可進行定量分析.
 

3.應用

無機化合物本身不產生熒光，可與有機熒光試劑配位構成發光體系后測最，約可測盆 60多種元素。測定無機化合物時常用的幾種熒光試劑有:8一羥基喹琳、2一羥基一3一萘甲酸、 2.2幾二經基偶氮苯及安息香等.被、鋁、翩、稼、硒、鎂、稀土金屬等元素的分析可采用普通熒光分析法。氛、硫、鐵、銀、鉆、鑲等元素可采用熒光碎滅法測定;鉻、妮、鈾、蹄等元素可采用低溫熒光法側定。具有熒光特性的有機化合物、生物及藥物化合物可直接采用熒光分析法側定。目前熒光分析法已成為側定腎上腺素、青祥素、苯巴比妥、維生素、普魯卡因等藥物的靈敏測定方法。對于不產生熒光的菌族化合物，經濃硫酸處理后，可使其不產生熒光的環狀醇類結構變成能產生熒光的酚類結構.然后側定。對于多組分熒光物質的測定，如果譜峰不相互重亞，則可分別測定;有部分重疊時，也可利用同步掃描方式，通過控制以來提高分辨率。

在分子熒光分析法中，利用激光誘導產生超高靈敏度，已能實時檢側到溶液中單分子的行為，如溶液中羅丹明6G分子、熒光索分子的單分子行為研究等.使該方面的研究工作受到廣泛關注。在生物和基因檢測方面，由于DNA自身的熒光盆子產率很低而不能直接檢測到，但以某些熒光分子作為探針，可通過探針標記分子的熒光變化來研究DNA。典型的熒光探針為澳化乙錠(EB)，Tb3+、吖啶類熒光染料、釔的配合物等也被使用.在基因檢測方面.目前也已逐步采用熒光染料作為標記物來取代同位素標記物。