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實驗室做標準曲線,這15個問題必須要注意!

放大字體  縮小字體 發布日期:2021-04-12
核心提示:1.儀器一定要校驗好。這個不用說為什么了。2.移取液體體積要精確,保證迅速準確,盡可能用一根移液管;為減少人為誤差,同一種液
 1.儀器一定要校驗好。這個不用說為什么了。


2.移取液體體積要精確,保證迅速準確,盡可能用一根移液管;為減少人為誤差,同一種液體要一個人操作。


3.保證標準品的純度,所用標準品最好是新打開的,純度較高的固體或溶液,防止污染。


4.容器要保證潔凈。容器保持清潔有時甚至比其他方面更重要,千萬不要忽略。

 

5.根據標準品理化性質注意加樣的先后順序。



6.如果要測OD值,應保證測前各管液體充分混勻。


7.若多次測試,有某個點誤差較大,應舍棄。


8.樣品的濃度等指標是根據標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結果無從談起。

 

9.并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內,包括上限和下限。而對于呈s型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度最陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內。


10.最好采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現較大的偏離。


 



11.檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。


12.標準曲線的樣品數一般為7個點,但至少要保證有5個點。


13.做出的標準曲線相關系數因實驗要求不同而有所變動,但一般來說,相關系數r至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999。


14.標準曲線需要人為的增加(0,0)點嗎?

 

不能增加。通常的標準系列多是配制0,1,2,3mg/L系列這樣的說法,沒做實驗人為添加(0,0)很不妥,因為很多時候0管進入儀器可能也有響應值,這也是我們考察試劑空白的一個重要步驟。這個0管在某些時候非常重要,如,全血鉛測定,我們采用牛血清來基體匹配標準系列,如果此時你用酸做空白或沒做實驗人為添加(0,0),那你就很難做好標準曲線,所以,標準曲線的0管也是做好標準曲線的重要考慮點。


15.標準曲線需要減掉試劑空白來做嗎?

 

不需要。儀器測出來標準系列的響應值可以減掉試劑空白或減掉0管的響應值來做,工作中我們也常用0管來做儀器調零。其實沒有必要那么麻煩,即使空白或0管有響應值,在構建標準曲線時,我們已經認為該響應值就是0濃度,也就是扣除了這個空白的。

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編輯:songjiajie2010

 
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關鍵詞: 標準
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