第一法冷原子吸收法

一、目的與要求：

1、  掌握用分光分度計測定總汞的方法

2、  初步掌握用冷原子吸收法測總汞的方法

二、原理：

汞蒸氣對波長253.7nm的共振線具有強烈的吸收作用，樣品經(jīng)過硝酸—硫酸或硝酸－硫酸—五氧化二釩消化使汞轉(zhuǎn)為離子狀態(tài)，在強酸性中以氯化亞錫還原成元素汞，以氮氣干燥清潔空氣作為載體，將汞吸出，進行冷原子吸收測定，與標準系列比較定量。

    三、試劑與儀器：

1、硝酸   

2、硫酸   

3、30％氯化亞錫溶液：稱取30克氯化亞錫(Sncl₂·2H₂0)加少量水，再加2ml硫酸使溶解后，加水稀釋至100ml，放置冰箱保存。

    4、無水氯化鈣，干燥用。

    5、5N混合酸液：量取10ml硫酸，再加人lOml硝酸，慢慢倒人50ml水中，冷后加水稀釋至100ml。

    6、五氧化二釩。

    7、5％高錳酸鉀溶液：配好后煮沸10分鐘，靜置過夜，過濾，棕色瓶中。

    8、20％鹽酸羥胺溶液。

    9、汞標準溶液：精密稱取0.1354克于干燥器干燥過的二氯化汞，加5N混合酸溶解后移入100ml容量瓶中，并稀釋至刻度，混勻，此溶液每毫升相當于1mg汞。  

    10、汞標準使用液：吸取1.0ml汞標準溶液，置于100毫升容量瓶中，加5N混合酸稀釋至刻度，此溶液每毫升相當于1ug汞，再吸取此液1.0，置于lOOml容量瓶中，加5N混合酸稀釋至刻度，此溶液每毫升相當于0.lug汞，用時現(xiàn)配。

    11、消化裝置一套。

    12、測汞儀。

13、汞蒸氣發(fā)生器。

14、抽氣裝置。

四、操作方法：

(一)樣品消化

1、回流消化法。

(1)、糧食或水分少的食品：，稱取10克樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒，加45ml硝酸，lOml硫酸，轉(zhuǎn)動錐形瓶防止局部炭化，裝上冷凝管后，小心火加熱，待開始發(fā)泡即停止加熱，發(fā)泡停止后，加熱回流2小時。如加熱過程中溶液變棕色，再加5ml硝酸，繼續(xù)回流2小時，放冷后從冷凝管上端小心加20ml水，繼續(xù)加熱回流10分鐘，放冷，用適量水沖洗冷凝管，洗液并入消化液中，將消化液經(jīng)玻璃棉過濾于lOOml容量瓶內(nèi)，用少量水洗錐形瓶，濾器，洗液并入容量瓶內(nèi)，加水至刻度混勻，取與消化樣品相同量的硝酸、硫酸，按同一方法做試劑空白試驗。

    (2)植物油及動物油脂：稱取5.0克樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒，加入7m1硫酸，小心混勻至溶液顏色變?yōu)樽厣�，然后�?0ml硝酸，裝上冷凝管后，以下按(1)自“小火加熱”起依法操作。

    (3)薯類、豆制品：稱取20克搗碎混勻的樣品(薯類須預先洗凈晾干)，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及30ml硝酸、5ml硫酸，轉(zhuǎn)動錐形瓶防止局部炭化，裝上冷凝管后，以下按(1)自“小火加熱”起依法操作。   

   (4)肉、蛋類：稱取10克搗碎混勻的樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃數(shù)粒及30ml硝酸，5m1硫酸，轉(zhuǎn)動錐形瓶防止局部炭化，裝上冷凝管以下按自(1) “小火加熱”起依法操作。   

    (5)牛乳及乳制品：稱取20克牛乳或酸牛乳，或相當于20克牛乳的乳制品(2.4克全脂乳粉，8克甜煉乳)，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及30ml硝酸，牛乳或酸牛乳加10ml硫酸，乳制品加5m1硫酸，轉(zhuǎn)動錐形瓶防止局部炭化。裝上冷凝管后，以下按(1)“小火加熱”起依法操作。

    2、五氧化二釩消化法   

    本法適用于水產(chǎn)品、蔬菜、水果。

    (1)取可食部分、洗凈，晾干、切碎、混勻，取2.50克水產(chǎn)品或l0克蔬菜，水果，置于50-lO0ml錐形瓶中，加50mg五氧化二釩粉末，再加8m1硝酸，振搖，放置4小時，加5m1硫酸，混勻，然后移至140℃砂浴上加熱，開始作用較猛烈，以后漸漸緩慢，待瓶口基本上無棕色氣體逸出時，用少量水沖洗瓶口，再加熱5分鐘，放冷。加5ml 5％高錳酸鉀溶液，放置4小時(或過夜)，滴加20％鹽酸羥胺溶液使紫色褪去，振搖，放置數(shù)分鐘，移入容量瓶中，并稀釋至刻度，蔬菜、水果為25ml，水產(chǎn)品為100ml。           

取與消化樣品相同量的五氧化二釩，硝酸，硫酸按同一方法進行試劑空白試驗。       

    (二)測定

    1、用回流消化法制備的樣品消化液

    (1)、吸取10.Oml樣品消化液，置于汞蒸氣發(fā)生器內(nèi)，連接抽氣裝置，沿壁迅速加入2m130％氯化亞錫溶液，立即通人流速為1.5升／分的氮氣或經(jīng)活性炭處理的空氣，使汞蒸氣經(jīng)過氯化鈣干燥管進入測汞儀中，讀取測汞儀上最大讀數(shù)，同時做試劑空白實驗。

(2)吸取0.00，0.10、0.20、0.30、0.40、0.50ML汞標準使用液(相當0、 0.01、0.02、0.03、0.04、0.05ug汞)置于試管中，各加10ml  l5N混合酸，以下按測定(1)自“置于汞蒸氣發(fā)生器內(nèi)”起依法操作，繪制標準曲線。

(3)計算：    

         X=((A₁-A₂)×1000)/( m×V₂/V₁×1000)

X：樣品中汞的含量，mg／kg；

A_l：測定用樣品消化液中汞的含量，ug；

A₂：試劑空白液中汞的含量，ug；

M；樣品質(zhì)量，g；

V_l：樣品消化液總體積，ml;

V₂：測定用樣品消化液體積，ml。

    2、用五氧化二釩消化法制備的樣品消化液

(1)    吸取10.Oml樣品消化液，以下按回流消化法的測定(1)的方法操做。

(2)    吸取0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ml汞標準使用液(相當0、

0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ug汞)，置于6個50ml容量瓶中，各加lmll：1)硫酸、lmll5％高錳酸鉀溶液，加20ml水，混勻，滴加20％鹽酸羥胺溶液使紫色褪去，加水至刻度混勻，分別吸取10.Oml(相當0.00、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10ug汞)，以下按回流消化法(1)自“置于汞蒸氣發(fā)生器內(nèi)”起依法操作，繪制標準曲線。

    (3)計算同前。 

第二法    雙硫腙法

一、原理：

樣品經(jīng)消化后，汞離子在酸性溶液中可與雙硫腙生成橙色絡合物，溶于三氯佐烷，與標準系列比較定量。

    二、試劑與儀器：

    1、硝酸

    2、硫酸

    3、1N硫酸：量取5m1硫酸、緩緩倒入l5Oml水中，冷卻后加水至180ml。

    4、5％硫酸：量取5ml硫酸，緩緩倒入90ml水中，冷卻后加水至98ml。

    5、氨水。

    6、溴麝香草酚藍指示液：0.1％乙醇溶液。

    7、20％鹽酸羥胺溶液：吹清潔空氣，可使含有的微量汞揮發(fā)除去。

    8、三氯甲烷：不應含有氧化物。 

    9、雙腙硫溶液：同食品中鉛的測定方法。

    10、雙腙硫使用液：同鉛的測定方法。

    11、汞標準溶液：精密稱取0.1354克經(jīng)干燥器干燥過的二氯化汞，加1N硫酸使其溶解后，移入lOOml容量瓶中，并稀釋至刻度。此溶液每毫升相當于1ml汞。

    12、汞標準使用液：吸取1.Oml汞標準溶液，置于lOOml容量瓶中，加1N硫酸稀釋至刻度，此溶液每毫升相當于lOug汞。再吸取此液5.Oml于50ml容量瓶中，加1N硫酸稀釋至刻度，此溶液每毫升相當于1ug汞。

13、消化裝置

14、分光光度計

三、操作方法：

(一)樣品消化

    1、糧食或水分少的食品：稱取20克樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及80ml硝酸、15ml硫酸、轉(zhuǎn)動錐形瓶，防止局部炭化。裝上冷凝管后，小火加熱，待開始發(fā)泡即停止加熱，發(fā)泡停止后加熱回流2小時。如加熱過程中溶液變棕色，再加5ml硝酸，繼續(xù)回流2小時，放冷，用適量水洗滌冷凝管，洗液并入消化液中，取下錐形瓶，加水至總體積為150ml。取與消化樣品相同量的硝酸，硫酸按同一方法做試劑空白試驗。

    2、植物油及動物油脂：稱取10克樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及15ml硫酸，小心混勻至溶液變棕，然后加入45ml硝酸，裝上冷凝管后，以下按1自“小火加熱”起依法操作。

    3、蔬菜、水果、薯類、豆制品：稱取50克搗碎混勻的樣品(豆制品直接取樣，其他樣品取可食部分洗凈，晾干)，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及45ml硝酸，15ml硫酸，轉(zhuǎn)動錐形瓶，防止局部炭化，裝上冷凝管后，以下按l自“小火加熱”起依法操作。

    4、肉、蛋、水產(chǎn)品：稱取20克搗碎混勻樣品，置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及45ml硝酸，15ml硫酸，裝上冷凝管后，以下按1自“小火加熱”起依法操作。

    5、牛乳制品：稱取50克牛乳、酸牛乳，或相當于50克牛乳的乳制品(6克全脂乳粉，20克甜煉乳，12.5克淡煉乳)置于消化裝置錐形瓶中，加玻璃珠數(shù)粒及45ml硝酸、牛乳、酸牛乳加15ml硫酸，乳制品加lOml硫酸裝上冷凝管后，以下按1自“小火加熱”起依法操作。

    (二)測定

    1、取1-5消化液(全量)，加20ml水，在電爐上煮沸10分鐘，除去二氧化氮等，放冷。

    2、于樣品消化液及試劑空白液中各加5％高錳酸鉀溶液至溶液呈紫色，然后再加20％鹽酸羥胺溶液使紫色褪去，加2滴麝香草酚藍指示液，用氨水調(diào)節(jié)PH，使橙紅色變?yōu)辄S色(PHl—2)定量轉(zhuǎn)移至125m1分液漏斗中。

    3、吸取0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.Oml汞標準使用液(相當于0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.Oug汞)，分別置于125m1分液漏斗中，加lOmll5％硫酸，再加水至40ml混勻。再各加lml20％鹽酸羥胺溶液，放置20分鐘并時時振搖。

4、于樣品消化液，試劑空白液及標準液振搖放冷后的分液漏斗中加5.Oml雙硫腙使用液，劇烈振搖2分鐘，靜置分層后，經(jīng)脫脂棉將三氯甲烷層濾人1cm比色杯中，以三氯甲烷調(diào)節(jié)零點。在波長490nm處測光度，標準管吸光度減去零管吸光度，繪制標準曲線。

計算：      

X=((A1-A2)×1000)/( M×1000)