1.首先人員操作誤差。我們是上市公司，實驗室的人一個微生物檢驗人員都是經(jīng)過嚴格考核的，微生物檢驗工作都有4到5年的操作檢驗，且出現(xiàn)污染后QC主管也一直在旁邊觀察了實驗人員的操作，并沒有發(fā)現(xiàn)有任何異常。因此可以排除人員操作誤差。

2. 設(shè)備和環(huán)境誤差。我們用于微生物檢驗的都是要求用可循環(huán)利用的經(jīng)過嚴格濕熱霉菌后再烘干的玻璃移液管、玻璃培養(yǎng)皿，無菌操作是在嚴格消毒后的生物安全柜中進行，且我們微生物限定室的級別是10萬級，所用的培養(yǎng)箱是滅菌消毒過的另外2臺培養(yǎng)箱，相同條件下所得檢品，一半導致培養(yǎng)，一半正置培養(yǎng)，但是正置培養(yǎng)的還是出現(xiàn)了污染，倒置培養(yǎng)的沒有被污染，真菌長的均勻有規(guī)則。由此設(shè)備和環(huán)境的誤差也可以排除在外。

3. 物品誤差。由于我們一直都是用生理鹽水、培養(yǎng)基，且都是經(jīng)過嚴格濕熱滅菌，高壓滅菌鍋也是經(jīng)過當?shù)厮幈O(jiān)局校準過的，且滅菌時間的調(diào)整在培養(yǎng)基性質(zhì)要求范圍內(nèi)，即排除了檢測用品的誤差。

綜合以上可以得出培養(yǎng)方案是造成污染的主要原因，隨即與當?shù)厮幈O(jiān)局取得聯(lián)系，經(jīng)溝通藥監(jiān)局對真菌的培養(yǎng)也是開始實施2016版的方法正置培養(yǎng)，且沒有出現(xiàn)蔓延的情況，藥檢所是將平板一個一個擺開正置培養(yǎng)，而沒有疊起來培養(yǎng)。

我們將平板一個一個擺開正置培養(yǎng)迅速做了驗證：我們將受污染的培養(yǎng)箱做了消毒滅菌，同時開啟了另外2臺沒有被污染的培養(yǎng)箱將需要做霉菌培養(yǎng)的含樣品的凝固平板分別放到2臺培養(yǎng)箱做分開擺放正置培養(yǎng)及堆疊擺放正置培養(yǎng)，我們的實驗室的6臺培養(yǎng)箱都是經(jīng)過校準的且都是同型號的生化培養(yǎng)箱，所以設(shè)備影響因素可以忽略，在培養(yǎng)擺放方式改變，其他基數(shù)不變的條件下培養(yǎng)，實驗結(jié)果是一個一個擺開正置培養(yǎng)的沒有受污染，而堆疊擺放正置培養(yǎng)的受到了污染。所以可以確定平板的擺放方式是造成污染的原因。

堆疊正置培養(yǎng)造成污染的原因分析：2016版方法要求培養(yǎng)皿正置培養(yǎng)在培養(yǎng)的第3天開始需要每天觀察和記錄培養(yǎng)結(jié)果，正置培養(yǎng)可以避免在觀察時反轉(zhuǎn)使霉菌的孢子抖動散落到培養(yǎng)基上而產(chǎn)生的次生菌落。我們都知道霉菌的特性就是有蔓延性，且由于培養(yǎng)箱加熱，培養(yǎng)箱內(nèi)部還有風機使內(nèi)部氣流在旋轉(zhuǎn)，2016版如果堆疊放置正置培養(yǎng)，且有一個樣品是有霉菌，那么菌絲就會通過縫隙拼命的往上爬，就像爬山虎一樣，開心的長著，且隨著生長孢子會脫落且特別輕，培養(yǎng)箱風機吹出的風把孢子吹散，停到蓋子上甚至通過蓋子之間的縫隙（蓋子沒有裝培養(yǎng)基比較輕）污染了其他的樣品，但是同一疊隨著菌絲的蔓延，通過培養(yǎng)皿直接蔓延到另外一個培養(yǎng)基上，一個蔓延一個，那么一疊被污染的情況會更嚴重，這也就驗證了我前面提到的同一疊同一個方向被污染的現(xiàn)象。并不是所有的企業(yè)實驗室都有好幾個培養(yǎng)箱的，所以就提醒一些微友們，2016版的方法千萬不要將霉菌堆疊培養(yǎng)，如果空間不夠可以在培養(yǎng)箱多裝幾個隔層，問題就解決了。

如果培養(yǎng)箱被污染了，可以用75%酒精和新潔爾滅兩種消毒劑對培養(yǎng)箱進行了全面的消毒，且大家最好是買那種有紫外消毒、臭氧消毒的培養(yǎng)箱，且消毒完最好不要馬上用，消毒完最好放個幾天在使用。