微生物的致病性是影響生物危害評估最重要的決定性因素。感染性微生物的危險度等級分類為實驗室生物危害評估和確立對待定病原體的生物安全防護水平奠定了基礎。一般地,危害度等級高的微生物需要的生物安全防護水平較高。但是,即便是對于同一種微生物,不同的實驗操作可能產生的潛在危害是不同的。所以在確定適當的生物安全水平時,除考慮病原體的危害度等級以外,還應考慮其他因素。例如,歸入危險度二級的微生物,進行操作處理時通常需要在BSL-2條件下進行。然而,如果特定實驗可能產生高濃度的氣溶膠時,在BSL-3條件下進行操作則更為恰當。又如,危害度二級的高只病性禽流感病毒和艾滋病病毒培養時要求在BSL-3防護水平實驗室進行操作,而對于未經培養的感染性材料則僅要求在BSL-2防護水平實驗室進行操作。
生物危害評估也可能在相關信息不足的情況下進行,這時按照WHO《實驗室生物安全手冊》第三版中的要求應謹慎地采取一些較為保守的標本處理方法。
1)只要采自病原體的標本,均應當遵循標準防護方法,并采用隔離的防護措施;
2)處理此類標本時最低需要二級生物安全水平;
3)標本的運送應當遵循國家和/或國際的相關規定。
生物危害評估不僅有助于確立實驗室標準化操作程序,有助于實驗室的合理設計與布局,有助于實驗設備和安全設備的正確配置與有效使用,而且有助于在工作過程中對于標準操作程序以及實驗室設備、設施的配備是否恰當和使用的有效性進行評價與改進。所以,生物危害評估活動應是一個動態的、不斷完善的過程。
加強安全體系建設 遠離獲得性感染
實驗室獲得性感染是指通過實驗工作等活動導致的工作人員及相關人員的感染,其中大約2/3的實驗室獲得性感染與在工作中直接接觸、使用含有傳染性病原體的標本或生物材料等有關。最常見的實驗室獲得性感染由上呼吸道吸入,經口食入尖銳物品刺傷接種及皮膚黏膜污染等形式的職業暴露所致。PIKE對3921例報告的實驗室感染分析表明,其中59%源自研究性實驗室,17%發生在臨床診斷性實驗室。大多數實驗室感染由細菌、病毒和立克次體引起。在這些實驗室感染中氣溶膠是最主要的傳播途徑,在實驗室以外引起的感染中70%是由噴濺、針刺或切割傷所致。
由于人類免疫缺陷病毒、丙型肝炎病毒、特別是由于SARS 冠狀病毒等不時引起實驗室感染的發生,人們重新認識到臨床實驗室工作人員可能由于職業原因暴露于引起疾病、甚至是致命疾病的病原微生物。這種通過實驗室職業暴露獲得的感染性疾病稱作實驗室獲得性感染。實驗室工作人員由于長期處在具有一定生物危險的環境中,同時由于實驗室獲得性感染并不總發生,漸漸地疏忽于對實驗室的生物安全管理,甚至放縱自己的行為而不能完全遵守相應的安全操作規范。這就需要我們對實驗室生物安全管理進行強化,通過加強生物安全管理并在工作過程中遵照經長期實踐而逐步建立的安全操作規范進行預防實驗室獲得性感染;通過實驗室生物安全體系建設,制定并執行相應生物安全水平的防護措施,繼續教育、培訓和督促實驗室工作人員規范自己的行為,從而把實驗室生物安全風險降低到最低程度。
(1)實驗室由于其規模、建筑布局、周圍環境、內部分割及通風條件等的不同而有不同的室內小氣候。室內小氣候的好壞、優劣,對實驗室工作人員的身體健康有很大的影響。實驗室也由于處理和檢測的標本不同、檢測目的和方法不同,其藏匿的具有潛在感染能力的微生物的種類、數量和存在形式亦不同。不同于研究型實驗室、臨床實驗室的標本中或生物材料中可能攜帶的潛在病原微生物往往是未知而多樣的。
(2)實驗室在工作過程中可能造成實驗室環境的污染,如離心、混勻、接種、制片、移液、加樣等可產生氣溶膠污染,標本噴濺等可直接污染皮膚黏膜及實驗臺面和地面等。另外,由于室內環境空間的限制,設備、人員擁擠以及通風換氣不充分等都可能使實驗室內病原體的濃度增加,使人群在室內被污染的機會明顯大于室外。另外,嚙齒動物、昆蟲等也都可攜帶傳播微生物病原體,給實驗室工作人員健康帶來威脅。
由于實驗室的標本來自不同的患者,其傳染性和只病性也是未知的,同時,實驗室生物安全體系建設的不平衡,所以實驗室安全水平的正確劃分和恰當應用也比較困難。生物安全問題往往是因為一些細節疏忽而導致的,所以建立完善的實驗室生物安全管理規章制度、生物安全操作規程,并在實際工作中采取措施嚴保執行,加強實驗室工作人員的培訓、同時關注實驗室工作人員的身體健康、制定實驗室發生獲得性感染時的應急預案勢在必行。
實驗室生物安全防護的四道防線
根據使用的一級和二級的防護屏障的不同,實驗室生物安全防護水平分為四級,防護水平由低到高排列即:一級生物安全水平(BSL-1)、二級生物安全水平(BSL-2)、三級生物安全水平(BSL-3)和四級生物安全水平(BSL-4)。所謂一級防護屏障是指生物安全柜和個人防護裝備等構成的防護屏障,二級防護屏障則是指實驗室的設施結構和通風系統等構成的防護屏障。不同級別的生物安全防護實驗室都是基于確保處理特定傳染病原體時的工作人員和環境的安全而進行設計的。
BSL-1:一級生物安全水平
BSL-1是圍護屏障水平和生物安全級別最低的生物實驗室,在該級別實驗室中進行的操作都是在室內開放空間進行的,所以,在其中活動所涉及的生物因子應是已知不引起健康成人感染的微生物。但是,應注意這些微生物也許有可能引起幼兒、老人或免疫患者的機會感染。
BSL-2:二級生物安全水平
BSL-2主要用于處理中度危險的病原體,如沙門氏菌屬和乙型肝炎病毒等。這些病原體可能通過意外的經口攝入或經皮膚、黏膜暴露而感染。在遵守標準操作程序的情況下,這些病原體的處理可在開放實驗臺進行。但是,如預期有發生噴濺或可產生氣溶膠時應使用生物安全柜等。
BSL-3:三級生物安全水平
BSL-3是為應對主要通過氣溶膠傳播的病原微生物如結核分支桿菌等的實驗室操作而設計的。BSL-3有嚴格的操作規程和程序,使用一級和二級防護屏障,同時對于諸如通風系統都有特殊的要求。
BSL-4:四級生物安全水平
BSL-4用于可引起致命疾病的病原體的處理和實驗操作,這些病原體可能通過氣溶膠傳播的或者沒有有效的疫苗預防或沒有有效的治療方法。BSL-4實驗室的實驗操作一般地應在三級生物安全柜內進行,或由身著正壓防護服的工作人員進行操作處理。BSL-4實驗室應是完全獨立的實驗室,其通風系統和廢物處理亦應完全獨立。