規(guī)范無(wú)菌室的使用管理，保持無(wú)菌室的衛(wèi)生環(huán)境，保證微生物檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

2.適用范圍

適用于實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌室的使用和管理。

3.職責(zé)

3.1實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)員負(fù)責(zé)無(wú)菌室的日常使用、維護(hù)。

3.2實(shí)驗(yàn)室領(lǐng)班負(fù)責(zé)無(wú)菌室的管理。

3.3部長(zhǎng)負(fù)責(zé)對(duì)無(wú)菌室管理情況進(jìn)行監(jiān)督檢查。

4.內(nèi)容及要求

4.1準(zhǔn)備工作

4.1.1 無(wú)菌室的準(zhǔn)備

4.1.1.1 無(wú)菌室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間、緩沖間和更衣室，無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，室內(nèi)溫度保持在20-24℃，濕度保持在45-60%。超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。

4.1.1.2 無(wú)菌室經(jīng)常保持清潔，每次使用前用紫外燈照射或臭氧消毒30分鐘以上方可使用，并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。

4.1.1.3 無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的消毒液，如75%酒精、0.1%的新潔爾滅溶液等。

4.1.1.4 無(wú)菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。

4.1.1.5 無(wú)菌室要求最大限度保持無(wú)菌狀態(tài)，禁止在無(wú)菌室以內(nèi)從事與微生物檢測(cè)操作無(wú)關(guān)的活動(dòng)。

4.1.2 著裝準(zhǔn)備

4.1.2.1無(wú)菌室用工作服、帽、鞋、口罩用前必須經(jīng)過(guò)紫外燈或臭氧消毒，無(wú)菌室的工作服應(yīng)經(jīng)常清洗，保持整潔。

4.1.2.2進(jìn)入無(wú)菌室要穿專用無(wú)菌工作服、帽、鞋、口罩，不準(zhǔn)將無(wú)菌室的工作服、鞋、帽穿出室外。

4.1.3操作人員準(zhǔn)備

操作人員在進(jìn)行無(wú)菌操作前，雙手必須進(jìn)行洗手消毒（75%酒精、0.1%新潔爾滅溶液等）。非操作人員嚴(yán)禁進(jìn)入無(wú)菌室。

4.2 操作要求

4.2.1 需要帶入無(wú)菌室使用的儀器、器械、平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法滅菌。

4.2.2 待檢樣品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開(kāi)啟，以防污染。4.2.3 進(jìn)入無(wú)菌室后，隨手關(guān)好門(mén)，操作過(guò)程中嚴(yán)禁人員出入。

4.2.4 無(wú)菌操作應(yīng)在超凈臺(tái)上進(jìn)行，每次操作過(guò)程中，均應(yīng)做空白對(duì)照試驗(yàn)樣，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。檢測(cè)過(guò)程嚴(yán)格按照檢測(cè)規(guī)程進(jìn)行，確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤。

4.2.5 儀器、器械、平皿等物品需從傳遞窗口傳入無(wú)菌室。

4.2.6 如有菌液或樣品灑在超凈臺(tái)上，應(yīng)立即用75%的酒精棉球擦拭干凈，在消毒處理。

4.2.7 滅菌后物品放在指定位置，注明滅菌日期，高壓滅菌物品可存放3天，過(guò)期不能再用，需重新包裝滅菌。

4.3 清洗要求

4.3.1 帶有菌液的吸管、試管、培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有0.1%新潔爾滅溶液或其它消毒溶液的消毒桶內(nèi)消毒。

4.3.2 凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)消毒后，才能在水龍頭下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。

4.3.3 操作完畢，臺(tái)內(nèi)物品全部取出并用消毒液噴灑消毒，用后的物品歸位，垃圾帶出無(wú)菌室，再用紫外燈輻照20分鐘。

4.4無(wú)菌室的清潔消毒

4.4.1 無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的消毒液滅菌清潔，以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。

4.4.2 無(wú)菌室應(yīng)每月檢查菌落數(shù)。在超凈工作臺(tái)開(kāi)啟的狀態(tài)下，取無(wú)菌培養(yǎng)皿分別放置工作位置的左中右等處，開(kāi)蓋暴露15分鐘后，倒置于36℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48小時(shí)，取出檢查。100級(jí)超凈臺(tái)平板雜菌數(shù)平均不得超過(guò)1個(gè)菌落，10000級(jí)無(wú)菌操作間平均不得超過(guò)3個(gè)菌落。如超過(guò)限度，應(yīng)對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行徹底消毒，直至重復(fù)檢查合乎要求為止。

4.4.3 除每日進(jìn)行清潔和使用前的殺菌之外，要根據(jù)空白樣的檢測(cè)情況，及時(shí)對(duì)無(wú)菌室進(jìn)行徹底的熏蒸或消毒。