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微生物實驗基礎(chǔ)操作常見問題解析

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-01-25
核心提示:在實驗操作中往往都會遇到這樣那樣的問題。不過,沒關(guān)系,記住下面這十一條小訣竅讓您輕松實驗!一、劃不出單個菌落怎么辦?1、平


在實驗操作中往往都會遇到這樣那樣的問題。不過,沒關(guān)系,記住下面這十一條小訣竅讓您輕松實驗!



一、劃不出單個菌落怎么辦?

1、平板上有過多的水分。

2、劃線時接種環(huán)未經(jīng)反復灼燒。

3、多區(qū)劃線,三區(qū)或四區(qū)劃線。




二、培養(yǎng)基配制時應注意的問題

1、滅菌溫度要嚴格控制,按照要求滅菌,尤其含糖量較高的培養(yǎng)基溫度不應太高,過高會導致糖分焦化,影響質(zhì)量。

2、瓊脂培養(yǎng)基不能反復溶化。反復溶化會破壞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。

3、培養(yǎng)基不能反復滅菌,反復滅菌也會導致營養(yǎng)成分的破壞。

4、含瓊脂的培養(yǎng)基滅菌后,要搖勻。




三、平板的保存

大多數(shù)平板如VRBA、DC、尿素酶生化管、顯色系列等要避光低溫保存。





四、產(chǎn)品的保存

1、干粉培養(yǎng)基:避光干燥,結(jié)塊后不能使用。

2、亞碲酸鉀卵黃增菌液、50%卵黃乳液等:冷凍保存,使用時,要常溫解凍,避免水浴加熱。

3、抗生素類:冷藏保存,溫度過高會導致靈敏度的下降。

4、兔血漿:冷藏保存少量的紅色不會影響結(jié)果。




五、觀察時間的掌握

按SN、GB等標準或培養(yǎng)基的使用說明所述時間進行觀察,時間過短或時間過長,單菌落的特征都不會很明顯。如單增李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基,時間短單菌落看不到卵磷脂環(huán),時間長綿羊李氏菌也會產(chǎn)生沉淀環(huán)。OXA、PALCAM的觀察也如此,時間過長,李氏菌使整個平板成黑色,不利于觀察單個菌落。




六、添加劑的添加

1、溫度的掌握。卵黃和抗生素類添加的溫度都不應太高。

2、定量。過多會抑制一些目標菌,太少又導致雜菌的過度生長。




七、培養(yǎng)溫度的掌握

1、真菌類。25-28℃培養(yǎng)

2、細菌類。李氏菌在增菌和生化中要求培養(yǎng)溫度在30℃左右。

3、其他一般在36℃左右。




八、接種方法

常用的方法主要有劃線、三點接種、穿刺接種、傾注接種、涂布接種、液體接種。




九、革蘭氏染色方法

染色時間的掌握、沖洗的方法。




十、生化實驗

1、接種的方法。

2、氧化型和發(fā)酵型實驗操作。

3、陽性菌種的對照。

4、接種前的純化。挑取單個菌落進行一系列的生化。




十一、關(guān)于殺菌的幾個概念

1、抑制:是在亞抑制劑量因子作用下導致微生物生長停止,但在移去這些因子后生長仍可以恢復的生物學現(xiàn)象。

2、死亡:在致死劑量因子的作用下或在亞致死劑量因子長時間的作用下,導致微生物生長能力不可逆喪失,即使移去這種因子后生長仍不能恢復的生物學現(xiàn)象。

3、防腐:在某些化學物質(zhì)或物理因子作用下,能防止或抑制微生物生長的一種措施,它能防止食物腐敗或防止食物霉變。

4、消毒:利用某種方法殺死或滅活物質(zhì)或物體中所有病原微生物的一種措施,它可以起到防止感染和傳播的作用。

5、滅菌:利用某種方法殺死物體中包括芽孢在內(nèi)的所有病原微生物的一種措施。

6、化療:利用具有選擇毒性的化學物質(zhì),例磺胺、抗生素等對生物體內(nèi)部被微生物感染的組織或病變細胞進行治療,以殺死組織內(nèi)的病原微生物或病變細胞,但對有機體無毒害作用的治療措施。 
編輯:songjiajie2010

 
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