培育雙孢菇三級菌種多以麥粒為原料，在實際生產中發現污染率較高，或出現異常現象，究其原因，就是菌種生產操作的不規范所致。現提出具體規范操作技術，供菇農朋友參考。

    1.原料處理：牛糞破碎處理后過篩，按1∶1.2加水拌勻，堆積發酵，每天翻堆一次，約20天左右，牛糞粉變為褐色、具有正常發酵草料的清香氣味，曬干備用。

    無受潮的小麥，充分泡透后撈出，適當遮陰、通風，發現表皮發干時，輕噴細霧濕潤，24小時后即可發芽，待麥芽長至1-2厘米時，即可使用。

    如果有蟲蛀麥粒，也可使用，但蟲蛀后的麥粒有孔洞，淀粉易流出，所以，必須多清洗幾遍；然后倒入pH值8-9的石灰水中，浸泡6小時后煮20分鐘左右，至麥粒無白心時，撈出麥粒，冷水沖洗后即可。

    2.基本配方：麥粒（以干品計）100公斤、牛糞粉30公斤、石膏粉1公斤、碳酸鈣1.5公斤。

    3.基質混合：將麥粒與牛糞粉按1∶0.2比例混合，并同時拌入其他輔料，注意使牛糞全部粘附到麥粒上，水分不足時適量噴水。剩余牛糞粉待用。

    4.裝瓶操作：一般小批量生產多不采用標準瓶，而利用酒瓶、葡萄糖玻璃瓶等，裝瓶滅菌。為降低生產成本，可用500毫升輸液瓶。先裝一把牛糞粉在瓶底，約1-1.5厘米厚，再裝麥粒，裝瓶時稍蹾瓶，使麥粒至瓶肩以下1厘米處，然后，再裝入1-2把牛糞粉，并用"L"形工具將之攤平、壓實，之后塞入棉塞。

    5.滅菌冷卻：采用高壓滅菌方法，壓力維持在0.15兆帕，保持2-2.5小時。滅菌結束后，壓力下降至零后，可取出料瓶，移入冷卻室或接種室，室內提前3天清理干凈，并噴灑百病傻溶液，料瓶降溫至30℃時即可接種。

    6.接種操作：室內噴灑一遍賽百09溶液后，將原種用75%酒精擦洗一次，打開接種凈化機，10分鐘后即可開始接種操作。每瓶（500毫升）原種可接40瓶以上。

    7.發菌培養：培養室（棚）提前清理衛生，地面灌水，地毯式噴灑百病傻溶液，密閉2天后，地面撒施石灰粉，即可將接種后的菌種移入。發菌期間，盡量控制培養室溫度在25℃左右，不超過28℃，安裝水溫空調的最低可降至22℃左右，一般農戶不具備條件，可采用土法降溫：發菌棚內地面上用磚碼起20厘米高，鋪上新塑料膜，將菌種瓶立式排入，灌入地下水，每天換水1-2次，即可使菌瓶內保持25℃以下。每3天左右噴灑一次藥物以作預防，可采用百病傻與賽百09交替施用；發現有菇蚊類成蟲時，隨即噴施高效氯氰菊酯予以殺滅。

    8.剔雜處理：接種后第三天，即開始檢查剔雜，發現任何非雙孢菇菌絲的菌瓶，隨即移出室外，有鏈孢霉菌污染的，應用方便袋從上往下套住菌瓶，慢慢移出。對一般雜菌的污染，可噴施藥物后將料倒出，曬干后再次利用；對鏈孢霉菌污染，應遠離培養室倒料，并予焚燒或深埋，空瓶用70℃以上熱水燙殺，洗凈后再用。

    9.暫時保存：約經35-45天，菌種完成發菌，暫時不用的菌種，應予低溫存放，一般保持2℃-4℃條件即可。

    10.質量檢驗：雙孢菇的菌絲濃白、清晰，生長有力，呈扇形生長，絨毛狀菌絲多、整齊，氣生菌絲潔白；現在采用最多的"2796"屬半氣生型品種，其菌絲旺盛、一致；沒有黃白色厚菌被；菌絲濃白粗壯，遇高溫時微黃、可出現少量束狀菌絲，上下均勻一致。

    瓶內菌絲生長不健壯、呈散亂狀態，或有"退菌"、斷菌"現象，料轉色、結塊或干縮，出現白色、淺黃色圓形塊狀物或不規則暗斑，有雜菌和螨類滋生，無蘑菇香味，具漂白粉或腥臭味等，均為不合格菌種。若菌絲呈淡黃白色，且菌絲萎縮，生長無力，或生長中就有菌被形成，則為培養基較濕或較老的菌種；菌種瓶內上部菌絲收縮變干，下部菌絲生長尚好，為培養基過干，培養溫度過高；如果生長不均勻，表明麥粒浸泡和預煮時間不夠；若生長中菌絲漸變黃，表明培養溫度過高；若菌種瓶內上方出現很厚的菌被，是生產性能差或生理性狀老化的菌種，不宜使用。一直在高溫條件下培養的菌種，播種后不易吃料，發菌慢。