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馬鈴薯莖尖脫毒及組培快繁技術

放大字體  縮小字體 發布日期:2013-07-18
核心提示:我國是馬鈴薯生產第一大國,2008年種植面積達到573.33萬hm2,鮮薯總產達8 800萬t,平均單產約15.45t/hm2,總產位居世界第一。馬鈴薯是無性繁殖作物,體內病毒的積累可使品種種性退化、品質和產量降低,對其生產造成嚴重危害。
      我國是馬鈴薯生產第一大國,2008年種植面積達到573.33萬hm2,鮮薯總產達8 800萬t,平均單產約15.45t/hm2,總產位居世界第一。馬鈴薯是無性繁殖作物,體內病毒的積累可使品種種性退化、品質和產量降低,對其生產造成嚴重危害。因為大部分病毒不能感染馬鈴薯莖尖組織,通過莖尖脫毒,生產脫毒種薯用于生產是防止馬鈴薯退化的切實可行的措施。馬鈴薯脫毒及組培快繁中所用基質和培養條件等關鍵技術方面的報道較多,但對下寨65和青薯168報道較少,本文既通過對馬鈴薯下寨65和青薯168兩個品種進行脫毒及組培試驗研究,為西部高原地區當家品種脫毒種薯的工廠化生產提供幫助。

1 材料和方法

1.1 供試材料

采用當家品種下寨65和青薯168.

1.2 試驗方法

1.2.1 催芽 于11月中旬左右,挑揀表皮光滑、正常薯形、大小均勻、無病害和無損傷薯塊,放置在有供暖的房間,室內溫度24 ℃左右進行催芽。在催芽前薯塊正處于休眠期,采用0.05~0.l0 mg/L的GA3來處理薯塊,浸沒于GA3溶液中10~20 min,以打破休眠[4].

1.2.2 種薯處理 采用MS培養基,加入不同配比的激素,準備BA、NAA、GA3、IBA和IAA,由于激素在培養基中用量非常少,且不易溶于水,所以采用特殊的配置方法,配置成500 mg/L的溶液待用。當兩個品種的種薯芽長到2~3 cm時,挑選生長健壯的芽,用清水沖洗芽部表面污物,在無菌操作室采用12種不同的方法進行表面消毒,用最近制作的蒸餾水沖洗四五次,將表面消毒劑徹底清除,不同表面消毒劑處理時間見表1.

1.2.3 莖尖組織培養 在解剖鏡下剝取大小為0.30~

0.50 mm莖尖生長點,置于不同濃度生長調節劑的MS培養基上進行培養,培養基編號為MS1~MS12,另設不加任何生長調節劑的MS培養基作為對照(CK),植物生長調節劑配比見表2.

1.2.4 馬鈴薯脫毒苗培養 在無菌條件下,將得到的無毒苗進行切段,每段帶一葉,置于不同種類、濃度的1/2MS培養基中進行培養,中國農業網以不加任何生長調節劑的1/2MS培養基作為對照,編號為M1~M9,快繁培養基配比見表3.

2 結果與分析

2.1 不同表面消毒方法對莖尖成活率和污染的影響

從表4可以看出,在莖尖組織培養過程中,外植體在清水沖洗后,直接采用0.1 %升汞或5 %次氯酸鈉消毒,都可以將污染控制在5 %以下,但需時稍長,不同程度地影響到成活率。另外由于升汞的滲透性強,不宜徹底清洗,且對環境污染嚴重,建議盡量不要使用。

2.2 不同生長調節劑培養基配比對莖尖組織生長的影響

從表5可以看出,不含生物調節劑的培養基,馬鈴薯莖尖組織的生長非常緩慢,導致成苗率低下。在同等條件下,KT和6-BA對馬鈴薯莖尖組織的生長都具有促進作用,且效果顯著,就這兩種物質而言,含有KT的培養基中成苗率較低。在同等條件下加入GA3,可明顯促進馬鈴薯莖尖組織分化,加快生長,提高成苗率。

2.3 不同生長調節劑配比對馬鈴薯脫毒苗快繁的影響

經過觀測表明,與對照培養基相比較,培養基中加入生長調節劑后,芽萌發推遲,有效促進幼根生長。生長調節劑濃度過大時,愈傷組織發達,生根受到抑制。在實驗中觀察到下寨65對NAA較為敏感,濃度稍大就會產生較大愈傷組織,生根較為緩慢,而青薯168反應較為遲鈍,結果見表6.

3 結論

通過實驗發現,在馬鈴薯脫毒技術實施過程中,采用酒精與其他兩種表面消毒劑配合使用效果最好,能有效控制污染,降低對莖尖組織的影響。剝離的莖尖組織誘導成苗是脫毒快繁的關鍵技術,在實驗中,KT和BA均有助于莖尖組織分化成苗。在快繁中,適當濃度的生物調節劑對馬鈴薯莖段生根有促進作用,但當濃度過高時只產生分生組織,不利于小苗生根,而且各品種表現有所不同。

編輯:foodqa

 
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