甘薯屬無(wú)性繁殖作物,甘薯田間繁殖很易感染病毒,造成產(chǎn)量和品質(zhì)大幅度下降。據(jù)報(bào)道脫毒三代與未脫毒的產(chǎn)量差異不顯著。而且脫毒薯在田間應(yīng)用年限越長(zhǎng),單株薯重越輕。通過(guò)組培快繁不但提高繁殖系數(shù),而且避免了病毒的感染,保持品種種性。岳薯1號(hào)、梅營(yíng)1號(hào)淀粉含量均達(dá)20%以上,產(chǎn)量超過(guò)45000kg/hm2;紫薯80是一個(gè)深受歡迎的、有廣闊市場(chǎng)前景的紫色品種。組培快繁對(duì)這3個(gè)無(wú)毒甘薯品種生產(chǎn)具有重要意義。
1 材料與方法
于4—6月份采集岳薯一號(hào)、梅營(yíng)一號(hào)、紫薯80無(wú)毒甘薯苗莖尖,用自來(lái)水沖洗0.5—1.0h。置于超凈工作臺(tái)上用無(wú)菌濾紙吸干水分后,用75%酒精浸30s,再用0.1%升汞消毒4min,最后用無(wú)菌水沖洗4—5次。剝?nèi)?.5mm左右的莖尖生長(zhǎng)點(diǎn),接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1)MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖4%上,芽萌發(fā)后剪下轉(zhuǎn)接于繼代增殖培養(yǎng)基(2)MS+BA4mg/L+NAA0.01mg/L+蔗糖4%或(3)MS無(wú)激素+蔗糖40%上繼代擴(kuò)繁。剪取0.5—1.0cm帶一葉一節(jié)莖段接于培養(yǎng)基(3)中培養(yǎng)生根。培養(yǎng)基中均加瓊脂0.65%,培養(yǎng)溫度25±1℃,光照10—12h/d,強(qiáng)度2000—2500 lx。試管苗生根培養(yǎng)21d后移栽于基質(zhì)中。
2 生長(zhǎng)與分化狀況
2.1 芽的誘導(dǎo)
莖尖在芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)7d轉(zhuǎn)綠,14d形成愈傷組織并產(chǎn)生芽。28—35d芽高度達(dá)1.0—1.5cm。
2.2 增殖培養(yǎng)
剪取誘導(dǎo)產(chǎn)生的芽接于培養(yǎng)基(2)上,接后10d莖基部即產(chǎn)生愈傷組織并開始萌發(fā)叢芽,35d產(chǎn)生叢芽3—5個(gè),最大高度達(dá)5.4cm。在此培養(yǎng)基增殖培養(yǎng)35d可增殖5—6倍;莖段在培養(yǎng)基(3)上3d即生根,腋芽也開始生長(zhǎng)。三周株高平均達(dá)5.8cm,具6—8片展開葉,21d繼代一次。在此培養(yǎng)基上增殖培養(yǎng)21d繁殖系數(shù)可達(dá)3—4倍。
2.3 生根培養(yǎng)
剪取0.5—1.0cm帶一葉一節(jié)莖段接于培養(yǎng)基(3)上,14d生根3—4條,根生長(zhǎng)速度較快,根最長(zhǎng)達(dá)3.6cm,梅營(yíng)1號(hào)根系在前7d里生長(zhǎng)稍慢,以后加快。
2.4 移栽
將培養(yǎng)21d的試管苗在自然光下閉瓶煉苗1d,再開瓶煉苗1—3d,然后洗去培養(yǎng)基,栽植于腐殖土與珍珠巖比例4:1的基質(zhì)中。覆蓋薄膜,5d后適當(dāng)通風(fēng),保持土壤濕潤(rùn),但膜內(nèi)相對(duì)濕度不宜過(guò)大,一般控制在85%—90%,移栽苗莖干粗壯,成活率達(dá)100%。
1 材料與方法
于4—6月份采集岳薯一號(hào)、梅營(yíng)一號(hào)、紫薯80無(wú)毒甘薯苗莖尖,用自來(lái)水沖洗0.5—1.0h。置于超凈工作臺(tái)上用無(wú)菌濾紙吸干水分后,用75%酒精浸30s,再用0.1%升汞消毒4min,最后用無(wú)菌水沖洗4—5次。剝?nèi)?.5mm左右的莖尖生長(zhǎng)點(diǎn),接種于芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基(1)MS+BA0.5mg/L+NAA0.1mg/L+蔗糖4%上,芽萌發(fā)后剪下轉(zhuǎn)接于繼代增殖培養(yǎng)基(2)MS+BA4mg/L+NAA0.01mg/L+蔗糖4%或(3)MS無(wú)激素+蔗糖40%上繼代擴(kuò)繁。剪取0.5—1.0cm帶一葉一節(jié)莖段接于培養(yǎng)基(3)中培養(yǎng)生根。培養(yǎng)基中均加瓊脂0.65%,培養(yǎng)溫度25±1℃,光照10—12h/d,強(qiáng)度2000—2500 lx。試管苗生根培養(yǎng)21d后移栽于基質(zhì)中。
2 生長(zhǎng)與分化狀況
2.1 芽的誘導(dǎo)
莖尖在芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)7d轉(zhuǎn)綠,14d形成愈傷組織并產(chǎn)生芽。28—35d芽高度達(dá)1.0—1.5cm。
2.2 增殖培養(yǎng)
剪取誘導(dǎo)產(chǎn)生的芽接于培養(yǎng)基(2)上,接后10d莖基部即產(chǎn)生愈傷組織并開始萌發(fā)叢芽,35d產(chǎn)生叢芽3—5個(gè),最大高度達(dá)5.4cm。在此培養(yǎng)基增殖培養(yǎng)35d可增殖5—6倍;莖段在培養(yǎng)基(3)上3d即生根,腋芽也開始生長(zhǎng)。三周株高平均達(dá)5.8cm,具6—8片展開葉,21d繼代一次。在此培養(yǎng)基上增殖培養(yǎng)21d繁殖系數(shù)可達(dá)3—4倍。
2.3 生根培養(yǎng)
剪取0.5—1.0cm帶一葉一節(jié)莖段接于培養(yǎng)基(3)上,14d生根3—4條,根生長(zhǎng)速度較快,根最長(zhǎng)達(dá)3.6cm,梅營(yíng)1號(hào)根系在前7d里生長(zhǎng)稍慢,以后加快。
2.4 移栽
將培養(yǎng)21d的試管苗在自然光下閉瓶煉苗1d,再開瓶煉苗1—3d,然后洗去培養(yǎng)基,栽植于腐殖土與珍珠巖比例4:1的基質(zhì)中。覆蓋薄膜,5d后適當(dāng)通風(fēng),保持土壤濕潤(rùn),但膜內(nèi)相對(duì)濕度不宜過(guò)大,一般控制在85%—90%,移栽苗莖干粗壯,成活率達(dá)100%。