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肌組織培養(yǎng)

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-07-08

各種肌組織均可用于培養(yǎng),以心肌和骨骼肌較實(shí)用。
(-)骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)
1、出生1一2天的乳鼠,引頸處死。
2、無(wú)菌取大腿肌組織,切成0.3一0.5cm2小塊后,用不含鈣鎂離子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,無(wú)菌紗網(wǎng)或紗布濾過(guò)。
3、計(jì)數(shù)調(diào)整細(xì)胞密度。
4、快接種量2×106/皿入培養(yǎng)基培養(yǎng)。
5、培養(yǎng)基內(nèi)含10%小牛血清,可加1%的胎汁以促進(jìn)分化。
接種在膠原或膠原的底物上能促進(jìn)細(xì)胞分化,明膠配置:用Hanks液配成0.01%明膠。
該細(xì)胞接種率約50%,細(xì)胞生長(zhǎng)開(kāi)始呈紡錘形,培養(yǎng)50-52小時(shí)后出現(xiàn)融合形成肌細(xì)胞狀多核纖維。數(shù)日后融合停止,此時(shí)可觀察到橫紋,一般在融合后二、三天內(nèi)能見(jiàn)到收縮現(xiàn)象。
(二)心肌細(xì)胞培養(yǎng)
心肌細(xì)胞是最早的培養(yǎng)材料,Carrel曾長(zhǎng)期培養(yǎng)過(guò)心肌組織,至今心肌仍不失為好的培養(yǎng)物,最常用的是雞胚心肌。
心肌比較容易培養(yǎng)和生長(zhǎng),可用懸滴培養(yǎng)、組織塊培養(yǎng)和消化培養(yǎng)法,均可獲良好的效果。取心室肌培養(yǎng)較好,原代培養(yǎng)的雞胚心肌呈紡錘形,培養(yǎng)成功時(shí),一周后可見(jiàn)節(jié)律性收縮現(xiàn)象。

 

 
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