1.培養(yǎng)細(xì)胞到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(約107細(xì)胞/ml)。
2.直接取0.1ml甲醛加到含有1ml培養(yǎng)物的離心管中固定細(xì)胞(甲醛濃度為3.7%;標(biāo)準(zhǔn)母液是37%)。
3.在甲醛中培養(yǎng)細(xì)胞30分鐘或稍長(zhǎng)時(shí)間。
4.用PBS洗兩次,離心5分鐘收集細(xì)胞。
5.用50μl的PBS懸浮細(xì)胞,加5個(gè)單位的羅丹明或熒光素連接的鬼筆環(huán)肽。
6.用PBS洗3次,重新懸浮在小體積的封固劑中。
7.用羅丹明或熒光素濾片觀察。