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實驗動物的麻醉方法

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2006-06-27

麻醉(anesthesia)的基本任務(wù)是消除實驗過程中所至的疼痛和不適感覺,保障實驗動物的安全,使動物在實驗中服從操作,確保實驗順利進(jìn)行。


一、常用的麻醉藥
(一)常用局部麻醉劑:普魯卡因,此藥毒性小,見效快,常用于局部浸潤麻醉,用時配成0.5%~1%;利多卡因,此藥見效快,組織穿透性好,常用1%~2%溶液作為大動物神經(jīng)干阻滯麻醉,也可用0.25%~0.5%溶液作局部浸潤麻醉。


(二)常用全身麻醉劑:
1. 乙醚 乙醚吸入法是最常用的麻醉方法,各種動物都可應(yīng)用。其麻醉量和致死量相差大,所以其安全度大。但由于乙醚局部刺激作用大,可刺激上呼吸道粘液分泌增加;通過神經(jīng)反射還可擾亂呼吸、血壓和心臟的活動,并且容易引起窒息,在麻醉過程中要注意。但總起來說乙醚麻醉的優(yōu)點多,如麻醉深度易于掌握,比較安全,而且麻醉后恢復(fù)比較快。其缺點是需要專人負(fù)責(zé)管理麻醉,在麻醉初期出現(xiàn)強(qiáng)烈的興奮現(xiàn)象,對呼吸道又有較強(qiáng)的刺激作用,因此,需在麻醉前給予一定量的嗎啡和阿托品(基礎(chǔ)麻醉),通常在麻醉前20-30分鐘,皮下注射鹽酸或硫酸嗎啡(每公斤體重5~10mg)及阿托品(每公斤體重0.1mg)。鹽酸嗎啡可降低中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性,提高痛閾,還可節(jié)省乙醚用量及避免乙醚麻醉過程中的興奮期。阿托品可對抗乙醚刺激呼吸道分泌粘液的作用,可避免麻醉過程中發(fā)生呼吸道堵塞,或手術(shù)后發(fā)生吸入性肺炎。
進(jìn)行手術(shù)或使用過程中,需要繼續(xù)給予吸入乙醚,以維持麻醉狀態(tài)。慢性實驗預(yù)備手術(shù)的過程中,仍用麻醉口罩給藥,而在一般急性使用,麻醉后可以先進(jìn)行氣管切開術(shù),通過氣管套管連接麻醉瓶繼續(xù)給藥。在繼續(xù)給藥過程中,要時常檢查角膜反射和觀察瞳孔大小(如發(fā)現(xiàn)角膜反射消失,瞳孔突然放大,應(yīng)立即停止麻醉。萬一呼吸停止,必須立即施行人工呼吸。待恢復(fù)自動呼吸后再進(jìn)行操作。
2. 苯巴比妥鈉 此藥作用持久,應(yīng)用方便,在普通麻醉用量情況下對于動物呼吸、血壓和其它功能無多大影響。通常在實驗前半至一小時用藥。使用劑量及方法為:狗腹腔注射80~100mg/kg體重,靜脈注射70~120mg/kg體重( 一般每公斤體重給70~80mg即可麻醉,但有的動物要100~120mg才能麻醉,具體用量可根據(jù)各個動物的敏感性而定)。兔腹腔注射150~200mg/kg體重。
3. 戊巴比妥鈉 此藥麻醉時間不很長,一次給藥的有效時間可延續(xù)3-5小時,所以十分適合一般使用要求。給藥后對動物循環(huán)和呼吸系統(tǒng)無顯著抑制作用,藥品價格也很便宜。用時配成1~3%生理鹽水溶液,必要時可加溫溶解, 配好的藥液在常溫下放置1~2月不失藥效。靜脈或腹腔注射后很快就進(jìn)入麻醉期,使用劑量及方法為:狗、貓、兔靜脈注射30~35mg/kg體重,腹腔注射40~45mg/kg體重。
4. 硫噴妥鈉 為黃色粉末,有硫臭,易吸水。其水溶液不穩(wěn)定,故必須現(xiàn)用現(xiàn)配,常用濃度為1~5%。此藥作靜脈注射時,由于藥液迅速進(jìn)入腦組織,故誘導(dǎo)快,動物很快被麻醉。但蘇醒也很快,一次給藥的麻醉時效僅維持半至一小時。在時間較長的實驗過程中,可重復(fù)注射,以維持一定的麻醉深度。此藥對胃腸道無副作用,但對呼吸有一定抑制作用,由于其抑制交感神經(jīng)較副交感神經(jīng)為強(qiáng),常有喉頭痙攣,因此注射時速度必須緩慢。實驗劑量和方法:狗靜脈注射20~25mg/kg體重;兔靜脈注射7~10mg/kg體重。靜脈注射速度以15秒鐘注射2ml左右進(jìn)行。小鼠1%溶液腹腔注射0.1~0.3ml/只;大鼠0.6~0.8ml/只。
5. 巴比妥鈉 使用劑量及方法:狗靜脈注射225mg/kg體重;兔腹腔注射200mg/kg體重;鼠皮下注射200mg/kg體重。
6. 氨基甲酸乙酯 此藥是比較溫和的麻醉藥,安全度大。多數(shù)實驗動物都可使用,更適合于小動物。一般用作基礎(chǔ)麻醉,如使用全部過程都用此麻醉時,動物保溫尤為重要。使用時常配成20~25%水溶液,狗、兔靜脈、腹腔注射0.75~1g/kg體重。但在作靜脈注射時必須溶在生理鹽水中,配成5%或10%溶液, 及每公斤體重注射10~20ml。鼠1.5~2g/kg體重,由腹腔注射。
以上麻醉藥種類雖較多,但各種動物使用的種類多有所側(cè)重。如做慢性實驗的動物常用乙醚吸入麻醉(用嗎啡和阿托品作基礎(chǔ)麻醉);急性動物實驗對狗、貓和大鼠常用戊巴比妥鈉麻醉;對家兔和青蛙、蟾蜍常用氨基甲酸乙酯;對大鼠和小鼠常用硫噴妥鈉或氨基甲酸乙酯麻醉。


二、麻醉方法
(一)全身麻醉:麻醉藥經(jīng)呼吸道吸入或靜脈、肌肉注射,產(chǎn)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)抑制,呈現(xiàn)神志消失,全身不感疼痛,肌肉松弛和反射抑制等現(xiàn)象,這種方法稱全身麻醉。其特點為抑制深淺與藥物在血液內(nèi)的濃度有關(guān),當(dāng)麻醉藥從體內(nèi)排出或在體內(nèi)代謝破壞后,動物逐漸清醒,不留后遺癥。
1. 吸入麻醉法 麻醉藥以蒸氣或氣體狀態(tài)經(jīng)呼吸道吸入而產(chǎn)生麻醉者,稱吸入麻醉,常用乙醚作麻醉藥。吸入法對多數(shù)動物有良好的麻醉效果,其優(yōu)點是易于調(diào)節(jié)麻醉的深度和較快的終止麻醉,缺點是中、小型動物較適用,對大型動物如狗的吸入麻醉操作復(fù)雜,通常不用。
具體方法是:使用乙醚麻醉兔及大小鼠時,可將動物放入玻璃麻醉箱內(nèi),把裝有浸潤乙醚棉球的小燒杯放入麻醉箱,然后觀察動物。開始動物自主活動,不久動物出現(xiàn)異常興奮,不停地掙扎,隨后排出大小便。漸漸地動物由興奮轉(zhuǎn)為抑制,倒下不動,呼吸變慢。如動物四肢緊張度明顯減低,角膜反射遲鈍,皮膚痛覺消失,則表示動物已進(jìn)入麻醉,可行手術(shù)和操作。在實驗過程中應(yīng)隨時觀察動物的變化,必要時把乙醚燒杯放在動物鼻部,以維持麻醉的時間與深度。
2. 注射麻醉法 常用的麻醉藥有戊巴比妥鈉、硫噴妥鈉、氨基甲酸乙酯等。
大、小鼠和豚鼠常采用腹腔注射法進(jìn)行全身麻醉。狗、兔等動物既可腹腔注射給藥,也可靜脈注射給藥。在麻醉興奮期出現(xiàn)時,動物掙扎不安,為防止注射針滑脫,常用吸入麻醉法進(jìn)行誘導(dǎo),待動物安靜后再行腹腔或靜脈穿刺給藥麻醉。
在注射麻醉藥物時,先用麻醉藥總量的三分之二,密切觀察動物生命體征的變化,如已達(dá)到所需麻醉的程度,余下的麻醉藥則不用,避免麻醉過深抑制延腦呼吸中樞導(dǎo)致動物死亡。


(二)動物局部麻醉方法:用局部麻醉藥阻滯周圍神經(jīng)末梢或神經(jīng)干、神經(jīng)節(jié)、神經(jīng)叢的沖動傳導(dǎo),產(chǎn)生局部性的麻醉區(qū),稱為局部麻醉。其特點是動物保持清醒,對重要器官功能干擾輕微,麻醉并發(fā)癥少,是一種比較安全的麻醉方法。適用于大中型動物各種短時間內(nèi)的實驗。
局部麻醉操作方法很多,可分為表面麻醉、局部浸潤麻醉、區(qū)域阻滯麻醉以及神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉。
1. 表面麻醉 利用局部麻醉藥的組織穿透作用,透過粘膜,阻滯表面的神經(jīng)末梢,稱表面麻醉。在口腔及鼻腔粘膜、眼結(jié)膜、尿道等部位手術(shù)時,常把麻醉藥涂敷、滴入、噴于表面上,或尿道灌注給藥,使之麻醉。
2. 區(qū)域阻滯麻醉:在手術(shù)區(qū)四周和底部注射麻醉藥阻斷疼痛的向心傳導(dǎo),稱區(qū)域阻斷麻醉。常用藥為普魯卡因。
3. 神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉:在神經(jīng)干(叢)的周圍注射麻醉藥,阻滯其傳導(dǎo),使其所支配的區(qū)域無疼痛,稱神經(jīng)干(叢)阻滯麻醉。常用藥為利多卡因。
4. 局部浸潤麻醉:沿手術(shù)切口逐層注射麻醉藥,靠藥液的張力彌散,浸入組織,麻醉感覺神經(jīng)末梢,稱局部浸潤麻醉。常用藥為普魯卡因。在施行局部浸潤麻醉時,先固定好動物,用0.5~1%鹽酸普魯卡因皮內(nèi)注射,使局部皮膚表面呈現(xiàn)一桔皮樣隆起,稱皮丘,然后從皮丘進(jìn)針,向皮下分層注射,在擴(kuò)大浸潤范圍時,針尖應(yīng)從已浸潤過的部位刺入,直至要求麻醉區(qū)域的皮膚都浸潤為止。每次注射時,必須先抽注射器,以免將麻醉藥注入血管內(nèi)引起中毒反應(yīng)。


三、使用全身麻醉劑的注意事項
給動物施行麻醉術(shù)時,一定要注意方法的可靠性,根據(jù)不同的動物選擇合適的方法,特別是較貴重的大型動物。
1. 麻醉劑的用量,除參照一般標(biāo)準(zhǔn)外,還應(yīng)考慮個體對藥物的耐受性不同,而且體重與所需劑量的關(guān)系也并不是絕對成正比的。一般說,衰弱和過胖的動物,其單位體重所需劑量較小,在使用麻醉劑過程中,隨時檢查動物的反應(yīng)情況,尤其是采用靜脈注射,絕不可將按體重計算出的用量匆忙進(jìn)行注射。

2. 動物在麻醉期體溫容易下降,要采取保溫措施。
3. 靜脈注射必須緩慢,同時觀察肌肉緊張、角膜反射和對皮膚夾捏的反應(yīng),當(dāng)這些活動明顯減弱或消失時,應(yīng)立即停止注射。配制的藥液濃度要適中不可過高,以免麻醉過急;但也不能過低,以減少注入溶液的體積。
4. 作慢性實驗時,在寒冷冬季,麻醉劑在注射前應(yīng)加熱至動物體溫水平。


四、實驗動物用藥量的確定及計算方法
(一)動物給藥量的確定
觀察一種藥物對實驗動物的作用時,一個重要的問題就是給動物用多大的劑量較合適。劑量太小,作用不明顯,劑量太大,又可能引起動物中毒致死。可以按下述方法確定劑量:
1. 先用少量小鼠粗略地探索中毒劑量或致死劑量,然后用小于中毒量的劑量,或取致死量的若干分之一作為應(yīng)用劑量,一般可取1/10~1/5。
2. 植物藥粗制劑的劑量多按生藥折算。
3. 化學(xué)藥品可參考化學(xué)結(jié)構(gòu)相似的已知藥物, 特別是化學(xué)結(jié)構(gòu)和作用都相似的劑量。
4. 確定劑量后,如第一次用藥的作用不明顯,動物也沒有中毒的表現(xiàn),可以加大劑量再次實驗。如出現(xiàn)中毒現(xiàn)象,作用也明顯,則應(yīng)降低劑量再次實驗。在一般情況下,在適宜的劑量范圍內(nèi),藥物的作用常隨劑量的加大而增強(qiáng)。所以有條件時,最好同時用幾個劑量作實驗,以便迅速獲得關(guān)于藥物作用的較完整的資料。如實驗結(jié)果出現(xiàn)劑量與作用強(qiáng)度之間毫無規(guī)律時,則更應(yīng)慎重分析。
5. 用大動物進(jìn)行實驗時,防止動物中毒死亡,開始的劑量可采用鼠類的1/15~1/2,以后可根據(jù)動物的反應(yīng)調(diào)整劑量。
6. 確定動物給藥劑量時,要考慮給藥動物的年齡大小和體質(zhì)強(qiáng)弱。 一般說確定的給藥劑量是指成年動物的,如是幼齡動物,劑量應(yīng)減小。如以狗為例:6 個月以上的狗給藥劑量為1份時,3~6個月的給1/2份, 45~89日的給1/4份,20~44日的給1/8 份,10~19日的給1/16份。
7. 確定動物給藥劑量時,要考慮因給藥途徑不同,所用劑量也不同。 以口服量為100時,皮下注射量為30~50,肌肉注射量為20~30,靜脈注射量為25。


(二)人與動物的用藥量換算方法
人與動物對同一藥物耐受性不同,一般動物的耐受性要比人大,單位體重的用藥量動物比人要高。必須將人的用藥量換算成動物的用藥量。一般可按下列比例換算:
人用藥量: 1
小鼠、大鼠: 50~100
兔、豚鼠: 15~20
狗、貓: 5~10
以上系按單位體重口服用藥量換算。如給藥途徑為靜脈、皮下、腹腔注射,換算比例應(yīng)適當(dāng)減小些。

 
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