1．材料
(1) 免疫過的血清抗體滴度高的Balb/c鼠。
(2) 1640培養液
(3) 2.5％FCS－1640營養液
2．操作方法
(1) 拉頸或用CO2處死小白鼠。
(2) 將小鼠放于70％酒精中浸泡消毒，取出固定于板上，在無菌條件下取脾。
(3) 把脾放入5ml含有2.5％FCS的1640液中，冰浴下輕輕洗去脾上的紅血球。
(4) 用鑷子輕輕擠壓脾，做成脾細胞懸液，用毛細管將懸液移入小試管中。
(5) 直立小試管3min，使大塊的結締組織下沉，把細胞懸液移入離心管中。
(6) 以2.5％FCS—1640充滿離心管，并以400g離心7min～10min（與此同時應開始制備骨髓細胞）。
(7) 把沉淀用約10ml的新鮮培養液再懸浮。
(8) 重復⑹、⑺步驟。
(9) 計算細胞，以臺盼蘭染色用相差顯微鏡檢查，活細胞數應高于80％為合格。