原理

應(yīng)用熒光素標(biāo)記的抗體或抗原進行免疫沉淀反應(yīng)，然后置于熒光顯微鏡下觀察。此法有利于微量可溶性抗原的檢查和鑒定。

材料與試劑配制

1．熒光素標(biāo)記抗體（或抗原）

2．待測可溶性抗原（或抗體）

3．醋酸纖維膜（10cm×2.5cm）

4．0.05Mol/L pH8.2巴比妥緩沖液

5．洗滌液 pH10.0的巴比妥緩沖液。

6．液體石蠟

操作方法

1．取5μl待測抗原進行膜電泳（見醋酸纖維膜電泳一節(jié)）電壓6V/cm~10V/cm，電流0.4mA/cm，電泳2h。

2．取下膜放入濕盒內(nèi)，沿抗體槽的位置放一條含標(biāo)記抗體濾紙條（約10μl），在室溫中孵育過夜。

3．去掉抗體紙條，將膜浸在洗滌液中1h。

4．流水中沖洗10min，置室溫干燥。

5．干后浸入液體石蠟中使其透明10min。

6．用熒光顯微鏡觀察熒光弧。