亚欧乱色视频网站大全,国产在线啪,不卡中文字幕在线观看,青青色在线视频,久久国产精品高清一区二区三区,国产a视频精品免费观看

VIP標識 上網做生意,首選VIP會員| 設為首頁| 加入桌面| | 手機版| RSS訂閱
食品伙伴網服務號
 
當前位置: 首頁 » 食品專題 » 生物實驗技術 » 免疫性技術 » 正文

淋巴細胞的分離

放大字體  縮小字體 發布日期:2006-06-28


材料與試劑

1.淋巴細胞分層液有兩種:

(1)聚蔗糖—泛影葡胺液:聚蔗糖(polysucrose solution),商品名Ficoll,分子量400 000,多配制成40±1%(W/V)水溶液,也有干粉出售。應用時,用蒸餾水配制9%溶液。泛影葡胺溶液(Meglumini diatrizoici),商品名Vrografin,結構式為3,5—二乙酰氨基2,4,6三碘苯甲酸1—去氧—甲氨基山梨醇。含量為60%或75%,每安瓶為20ml裝,常用于人的臟器造影。應用時,取60%泛影葡胺原液20ml,加雙蒸餾水15.38ml,即為33.9%泛影葡胺。


1.077±0.001聚蔗糖—泛影葡胺的配制:

9%聚蔗糖液 24份

33.9%泛影葡胺液 10份

混合即可。必要時,可測比重。需要備用,可用G5漏斗過濾除菌或114.3℃高壓滅菌15min,4℃保存。一般可保存3個月。

(2)泛影葡胺—右旋糖酐(dextran)液

34%泛影葡胺液 10份

60%右旋糖酐液 12.5份

混合,即為比重1.07~1.09的分層液。分裝于棕色瓶中,4℃冰箱保存備用。

2. 3%的明膠液 稱取明膠3g,溶于0.9%的滅菌生理鹽水,終體積100ml,114.3℃高壓滅菌10min,冷卻后4℃冰箱保存,臨用時37℃預熱10min。

3.Hank’s液。


操作方法

1.取抗凝血,自然沉降,如是馬屬動物的血液,可直接直立試管架上,讓其自然沉降1h,取上層血漿。如是牛、羊血液,由于其血沉速度非常慢,可加等量3%明膠液,混勻后讓其自然沉降,1h后取上層血漿。

2.2 000r/min離心10min,棄上清。

3.沉淀用Hank’s液混懸后,再2 000r/min離心10min。

4.重復步驟3一次,再用細胞營養液將白細胞制成懸液。此液含有整個白細胞群,包括粒細胞、淋巴細胞、單核細胞和部分紅細胞。可供白細胞計數用。

5.取2ml細胞分層液于離心管內,同時用毛細吸管吸取約2ml的血漿(自然沉降1h的上層血漿)輕輕加入分層液上,直接加抗凝血也可。

6.以水平轉子離心機2 000r/min離心20min。離心后,可見分成多層,最下層是紅細胞,中間層是分層液,最上層是血漿。在血漿層與分層液之間是一薄層較致密的白色層,即為單個核細胞層。

7.用毛細吸管插入到單個核細胞層并吸取該層,放入另一試管中。

8.以Hank’s液洗滌、離心,最后配制成適當的白細胞濃度。必要時可計數。


注意事項

1.血漿或血液加入分層液中時要小心,緩慢不要打亂液層、不要搖動。也可以將分層液加入到血漿的上層。

2.保持淋巴細胞的活性是非常重要的,所以一般情況下,是現采血,馬上進行分離。

3.經過分層液分離的淋巴細胞層,實際上是單個核細胞層,包括單核細胞,不包括粒細胞。欲分離出純的淋巴細胞,則按下法除去單核細胞,或收獲單核細胞。

 
[ 網刊訂閱 ]  [ 食品專題搜索 ]  [ ]  [ 告訴好友 ]  [ 打印本文 ]  [ 關閉窗口 ] [ 返回頂部 ]

 

 
推薦圖文
推薦食品專題
點擊排行
 
 
Processed in 0.377 second(s), 19 queries, Memory 0.88 M
主站蜘蛛池模板: 99久久精品费精品国产一区二| 久久免费观看视频| 日韩成人小视频| 中文字幕在线视频免费| 国产成人精品综合久久久| 日本久操| 成人精品视频在线观看播放| 花蒂肿大调教打针| 亚洲国产欧美久久香综合| 99色综合| 日本亚洲欧洲高清有码在线播放| 亚洲黄色在线| 玖玖视频精品| 又黄又免费的视频| 国产欧美在线观看| 邪恶黄色| 成人高清在线| 日韩在线aⅴ免费视频| 伊人网网站| 欧美理论电影在线观看| 最新欧美日韩| 精品久久久久久| 亚洲色图视频在线| 国产成人宗合| 亚洲国产精品自产拍在线播放| www在线视频在线播放| 日韩网站在线观看| 99re热这里只有精品66| 青青草国产精品人人爱99| 伊人久久影视| 欧美九九| www亚洲欲色成人久久精品| 欧美日本高清视频在线观看| 最新国产午夜精品视频成人| 久久大香伊人中文字幕| 在线看免费毛片| 久在线观看| www.久久精品视频| 欧美精品久久久久久久免费观看 | 97成人资源| 日本黄大片在线观看视频|