為具有與某RNA鏈呈互補的堿基序列的單鏈DNA即complementary DNA之縮寫，或此DNA鏈與具有與之互補的堿基序列的DNA鏈所形成的DNA雙鏈。與RNA鏈互補的單鏈DNA，以其RNA為模板，在適當引子的存在下，由依賴RNA的DNA多聚酶（反復制酶）的作用而合成，并且在合成單鏈cDNA后，在用堿處理除去與其對應的RNA以后，以單鏈cDNA為模板，由依賴DNA的DNA多聚酶或依賴RNA的DNA多聚酶的作用合成雙鏈cDNA。真核生物的信使RNA或其他RNA的cDNA，在遺傳工程方面廣為應用。在這種情況下，mRNA的cDNA，與原來基因的DNA（基因組DNA，genomic DNA）不同而無內含子；相反地對應于在原來基因中沒有的而在mRNA存在的3′末端的多A序列等的核苷序列上，與exson序列、先導序列以及后續序列等一起反映出mRNA結構。