1. 取蠟塊切片15-20張（8UM），置于EP管中，加入1ML的二甲苯，37度作用3小時(shí)，10000×3分鐘，傾去二甲苯。重復(fù)3-4次，觀察管壁是否光滑。若有蠟質(zhì)殘存，需繼續(xù)脫蠟。
2. 剃度酒精水化：100% 1ML，室溫30分鐘，10000×3分鐘，去上清；95%；75%；50%。
3. 消化：1×SSC 500UL ，洗滌沉淀，12000×3M離心。干燥沉淀后加石蠟消化液 400UL，20mg/ml的PK 20ul；55度消化120小時(shí)，至第四天，補(bǔ)加PK 10ul。
4. 消化后見(jiàn)液體清亮，肉眼見(jiàn)組織較少。將其轉(zhuǎn)入98度的水浴箱煮沸10分鐘，以滅活PK，置冰上迅速冷卻，離心10000×5分鐘。
5. 取上清加等量的酚-氯仿，輕顛倒混勻成乳白色，低溫離心，14000×10分鐘。小心取上清，再加等量的酚-氯仿，混勻，離心。
6. 取上清加冰無(wú)水乙醇兩倍體積及1/10的乙酸鈉（PH 5。2），顛倒混勻。置-20度半小時(shí)，14000×10分鐘低溫離心，去上清。
7. 沉淀用70%的乙醇洗滌2次，（加1ML，顛倒EP管數(shù)次，14000×5分鐘，離心），自然干燥沉淀。
8. 加TE20ul，（含RNA酶），4度過(guò)夜。
20×SSC 配方：3mol/l Nacl ，0。3 M 檸檬酸三鈉·2H2O ，用HCL調(diào)PH值至7。0
石蠟消化液：150nmol/l NacL：15mmol/l檸檬酸鈉，1%SDS，PH 7。0。
