移液槍是實(shí)驗(yàn)室最常用的儀器之一,是實(shí)驗(yàn)室不可或缺的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)儀器。
移液槍多少會影響一些精密實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)質(zhì)量,細(xì)節(jié)決定成敗,今天在這里跟大家普及一下移液槍的使用規(guī)程及注意事項(xiàng),希望對大家以后的實(shí)驗(yàn)有幫助。
移液槍的結(jié)構(gòu)及使用前檢查
移液槍在使用前,應(yīng)進(jìn)行使用前檢查:
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檢查刻度是否在最大值
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旋轉(zhuǎn)旋鈕,檢查讀數(shù)是否準(zhǔn)確
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外觀是否干凈
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按動按鈕檢查是否順暢或者有噪音
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校對調(diào)整移液槍
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使分配的體積在一定的規(guī)格范圍內(nèi)
移液槍的使用
1、首先確定移液體積,選擇合適量程的移液槍
移液槍吸頭一般分為白,黃,藍(lán)三種,其中0.1-2.5 ul,0.5-10 ul,2-20 ul使用白吸頭;5-50 ul,10-100 ul,20-200 ul使用黃吸頭;100-1000 ul使用藍(lán)吸頭。
大多數(shù)情況下移液槍不同顏色的控制按鈕對應(yīng)不同的槍頭顏色,這是防止實(shí)驗(yàn)人員按錯槍頭的小方法。
2、容量設(shè)定
手柄的顯示窗口確定移液槍的移液量,旋轉(zhuǎn)控制旋鈕設(shè)置量程。
從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉(zhuǎn)刻度即可從小量程調(diào)節(jié)至大量程時,應(yīng)先調(diào)至超過設(shè)定體積刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,這樣可以保證移液槍的精確度。
3、安裝吸頭
將移液槍頂端插入吸頭,在輕輕用力下壓的同時,輕微轉(zhuǎn)動上緊即可。
注意將移液槍垂直插入吸頭,用移液槍撞擊吸頭的方法是非常不可取的,長期這樣操作回導(dǎo)致移液槍的零件因撞擊而松散,嚴(yán)重會導(dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住。
4、吸液
吸液前吸頭先在液體中預(yù)潤洗,慢吸慢放,把控制按鈕壓至第一停點(diǎn),吸頭尖端浸入液面3 mm以下,垂直吸液,緩慢平穩(wěn)松開按鈕,吸入液體,再將吸頭提離液面。
正確的入液深度較多可使準(zhǔn)確度提高5%。微量移液槍的吸頭入液深度應(yīng)當(dāng)為1-2 mm,大量程移液槍的吸頭入液深度較高為3-6 mm,具體取決于吸頭大小。
如果吸頭入液太深,那么吸頭中的氣壓會增大,導(dǎo)致吸入過多的液體。
5、放液
放液時,將吸頭緊貼容器內(nèi)壁,把控制按鈕壓到第二停點(diǎn),將全部液體排出。
放液時如果量很小則應(yīng)吸頭尖端可靠容器內(nèi)壁。吸有液體的移液槍不應(yīng)平放,吸頭內(nèi)的液體很容易污染槍內(nèi)部而可能導(dǎo)致槍的彈簧生銹。
移液槍吸頭在樣品中的入液角度應(yīng)當(dāng)盡量接近90度,與垂直方向偏離不超過20度。角度太大可能導(dǎo)致吸頭中吸入太多的液體,造成吸液不準(zhǔn)確。
例如,在與垂直方向呈30度角時,可過多吸入達(dá)0.7%的液體。
5、退卸吸頭
卸去吸頭,用吸頭卸卻按鈕卸去,將吸頭打入廢液缸。
移液槍的使用注意事項(xiàng)
1、移液槍在每次實(shí)驗(yàn)后應(yīng)將刻度調(diào)至最大,讓彈簧回復(fù)原型,延長移液槍的使用壽命。
2、吸取液體時不允許突然松開,要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,否則溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
3、為獲得較高的精度,槍頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因?yàn)槲⊙?/span>蛋白質(zhì)溶液或有機(jī)溶劑時,槍頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。
4、濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補(bǔ)償量,可由試驗(yàn)確定,補(bǔ)償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進(jìn)行設(shè)定。
5、可用分析天平稱量所取純水的重量并進(jìn)行計算的方法,來校正取液器,1mL 蒸餾水20℃時重0.9982g。
6、在設(shè)置量程時,請注意旋轉(zhuǎn)到所需量程數(shù)字清清楚楚在顯示窗中,所設(shè)量程在移液槍量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機(jī)械裝置,損壞了移液槍。
7、移液槍嚴(yán)禁吸取有強(qiáng)揮發(fā)性、強(qiáng)腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機(jī)物等)。
8、在進(jìn)行高精度試驗(yàn)時,遇到粘度較大的液體,移液槍禁止快速吹打混勻液體,會產(chǎn)生誤差。
10、如果進(jìn)行RNA提取相關(guān)操作,事先用RNAzap進(jìn)行除酶,并照射紫外30 min-1h,如果進(jìn)行細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn),請?jiān)谑褂们昂笳丈渥贤?0 min-1h,并在使用前用75%乙醇擦拭。注意酒精棉球不可太濕,酒精流吸頭內(nèi)會影響槍頭氣密性,并污染內(nèi)容物。
11、所有的樣品之間都應(yīng)保持一致的移液節(jié)奏。避免匆忙或快速的操作,要掌握移液過程中每個步驟的節(jié)奏。