目的:建立紫外可見分光光度計操作規程,確保其使用安全、正確。
范圍:適用于752型紫外可見分光光度計。
一、操作規程:
1. 打開儀器開關,儀器使用前應預熱30分鐘。
2. 轉動波長旋鈕,觀察波長顯示窗,調整至需要的測量波長。
3. 根據測量波長,撥動光源切換桿,手動切換光源。200-339nm使用氘燈,切換桿撥至紫外區;340nm-1000nm使用鹵鎢燈,切換桿撥至可見區。
4. 調T零
在透視比(T)模式,將遮光體放入樣品架,合上樣品室蓋,拉動樣品架拉桿使其進入光路。按下“調0%”鍵,屏幕上顯示“000.0”或“-000.0”時,調T零完成。
調100%T/ OA
先用參比(空白)溶液蕩洗比色皿2-3次,將參比(空白)溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動樣品架拉桿使其進入光路。按下“調100%”鍵,屏幕上顯示“BL”延時數秒便出現“100.0”(T模式)或“000.0”、“-000.0”(A模式)。調100%T/ OA完成。
測量吸光度
參照操作步驟3、步驟4。
在吸光度(A)模式,參照步驟5調100%T/ OA。
用待測溶液蕩洗比色皿2-3次,將待測溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿 高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動樣品架拉桿使其進入光路,讀取測量數據。
測量透視比
參照操作步驟3、步驟4。
在透視比(T)模式,參照步驟5調100%T/ OA。
用待測溶液蕩洗比色皿2-3次,將待測溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿 高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動樣品架拉桿使其進入光路,讀取測量數據。
濃度測量
參照操作步驟3、步驟4。
在透視比(T)模式,參照步驟5調100%T/ OA。
用標準濃度溶液蕩洗比色皿2-3次,將標準濃度溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動樣品架拉桿使其進入光路。
按下“功能鍵”切換至濃度(C)模式。
按下“▲”或“▼”鍵,設置標準溶液濃度,并按下“確認”鍵。
用待測溶液蕩洗比色皿2-3次,將待測溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿 高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動樣品架拉桿使其進入光路,讀取測量數據。
斜率測量
參照操作步驟3、步驟4。
在透視比(T)模式,參照步驟5調100%T/ OA。
按下“功能鍵”切換至斜率(F)模式。
按下“▲”或“▼”鍵,設置樣品斜率。
9.5 用待測溶液蕩洗比色皿2-3次,將待測溶液倒入比色皿,溶液量約為比色皿 高度的3/4,用擦鏡紙將透光面擦拭干凈,按一定的方向,將比色皿放入樣品架。合上樣品室蓋,拉動樣品架拉桿使其進入光路,按下“確認”鍵(此時儀器自動切換至濃度(C)模式),讀取測量數據。
10. 測量完畢
10.1 測量完畢后,清理樣品室,將比色皿清洗干凈,倒置晾干后收起。
10.2 關閉電源,蓋好防塵罩,結束試驗。
二、注意事項:
調100%T/ OA后,儀器應穩定5分鐘再進行測量。
光源選擇不正確或光源切換桿不到位,將直接影響儀器的穩定性。
比色皿應配對使用,不得混用。置入樣品架時,石英比色皿上端的“Q”標記(或箭頭)、玻璃比色皿上端的“G”標記方向應一致。
玻璃比色皿適用范圍:320nm~1100nm,石英比色皿適用范圍:200nm~1100nm。