一、儀器安裝調試
儀器安裝最好外接穩壓器,安裝安全閘防止突然停電造成難以排除的故障。還要安裝銅板地線,這樣可使峰譜線穩定。儀器各項技術指標的調試采用18種氨基酸混合標樣(日本和光試劑公司H型氨基酸混合標準液)。
1. 基酸分辨率的檢測該儀器要求蘇一絲氨基酸分辨率為70%以上,甘-丙氨基酸分辨率為80%以上,采用5個標樣經檢測蘇-絲氨基酸分辨率為85%以上,甘一丙氨基酸分辨率為以95%上(試驗數據表略)。
2. 氨基酸峰位重現性檢測:5個標樣連續多次檢測,丙氨酸最高和最低出峰保留時間不超過1分鐘,精氨酸出峰時間最高和最低偏差在1%以內(試驗數據表略)。
3. 氨基酸蜂面積重現性檢測:5個標樣、經多次檢測甘氨酸和丙氨酸峰面積重現性編差平均值均達儀器指標2.5%以下(數據表略)。
4. 儀器重復性檢測:儀器分離柱重新裝樹脂后,對10個標樣進行檢測,,17種氨基酸(不包括氨峰)的出峰保留時間(t)和峰面積(A)的變異系數(CV)值列表1。
表1看出種17氨基酸值均在以1%內,說明各種氨基酸峰面積再現性較好,儀器重復性好。
二、不同樣品氨基酸含里測定
1. 儀器檢測原理和方法:該分析儀不銹鋼分離柱內裝有專利2619混合離子交換樹酯(Hitachi Cuiuomion-Exchange Resin),根據離子吸附交換的原理,,樣品用6摩爾鹽酸水介法處理后,經自動進樣器定量,然后進入分離柱,用流量穩定的泵1輸送規定的緩沖液,按事先編好的程序卡規定的程序自動淋洗,樣品水介后的酸性、中性和堿性氨基酸分別從分離柱上被洗脫下來,各種氨基酸分次與泵2輸送的茚三酮顯色液在混合器中充分混合,在溫度為100℃左右的反應浴中進行顯色,生成紫色色素Dikepohydrindlidene Dikerohydrinaomine(DrDA),此紫色發色液經單色分離器的分光光度計,用570 納米和440 納米兩個注長連續檢測,得到的吸光度進行信號放大,記錄儀自動繪出各神氨基酸峰譜,以標準氨基酸峰譜為基準,采用峰面極H·W 法進行結果計算,或通過數據處理系統進行計算打印,得出各種氨基酸含量。
2. 分析結果:為了檢測儀器的穩定性,選用了各種不同樣品20個,進行氨基酸含量的測試,測定數據列表2。
表2 數據是經多次測定的結果,編差均在0.01~0.05以內,而且和其它氨基酸分析儀測定的數據相比較結果基本一致。