油鏡的透鏡很小，光線通過玻片與油鏡頭之間的空氣時，因介質密度不同，發生折射或全反射，使射入透鏡的光線減少，物象顯現不清。若在油鏡與載玻片之間加入和玻璃折射率（n=1.52）相近的香柏油（n=1.515），則使進入透鏡的光線增多，視野亮度增強，使物象明亮清晰。 

  由于細菌體積微小，故在細菌的形態學研究中，經常需要借助顯微鏡油鏡，才能比較清楚地進行觀察。因此，必須熟練地掌握油鏡的使用及保護法。 
 

二、油鏡頭的識別
 

  接物鏡的放大率可由其外形辨認，鏡頭長度越大，鏡片直徑越小，放大倍數大；反之，放大倍數小。油鏡頭長度大于低、高倍鏡，鏡頭下緣一般刻有一圈黑線或白線，并刻有100×、1.25或oil等字樣。 
 

三、油鏡的使用法 
 

1 使用顯微鏡油鏡時，必須將顯微鏡端正直立桌上，不得將鏡臂彎曲，使載物臺傾斜，以免香柏油流溢，影響觀察，污染臺面。 

2 對光 

  采用天然光為光源時，宜用平面反光鏡；若用人工燈光時，則用凹面鏡。 
  首先打開光圈，轉動反光鏡，使光線集中于集光器。可根據需要，上下移動集光器和縮放光圈，以獲得最佳光度。 

  一般用低倍鏡或高倍鏡觀察物象或用油鏡檢查不染色標本時，需下降集光器并適當地縮小光圈，使光度減弱；若用油鏡檢查染色標本時，光度宜強。應 將顯微鏡亮度開關調至最亮，光圈完全打開，集光器上升至與載物臺相平。 

3 調焦距： 

①將標本片放載物臺上，用標本推進器固定，將欲檢部分移至接物鏡下。先用低倍鏡找出標本的位置，然后提高鏡筒，在標本的待檢部位滴鏡油一滴，再換油鏡觀察。 

②轉動粗調節器使載物臺徐徐上升（或使鏡筒漸漸下降），直至油鏡頭浸沒至油中。此時眼睛應從側面觀察，以免壓碎標本片和損壞鏡頭。 

③然后雙眼移至接目鏡，一面從接目鏡觀察，一面反方向緩慢地轉動粗調節器（下降載物臺，或上升鏡筒），當出現模糊物象時，換用細調節器，轉動至物象清晰為止。 
④觀察完畢，應先提高鏡筒，并將油鏡頭扭向一側，再取下標本片。油鏡頭使用后，應立即用擦鏡紙擦凈鏡頭上的油。若鏡油粘稠干結于鏡頭上，可用擦鏡紙蘸少許二甲苯擦拭鏡頭，并隨即用干的鏡紙擦去殘存的二甲苯，以免二甲苯滲入，溶解用以粘固透鏡的膠質物，造成鏡片移位或脫落。