培養基保存于 4 ℃ 冰箱中，培養基內的CO₂ 會逐漸溢出，造成培養基越來越偏堿性，而培養基中的酸堿指示劑 (通常為 phenol red) 的顏色也會隨堿性增加而更偏紫色。培養基偏堿的結果， 將造成細胞生長停滯或死亡。若培養基偏堿時，可以通入無菌過濾 CO₂，以調整 pH 值。